[發(fā)明專(zhuān)利]一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111575916.6
• 申請(qǐng)日: 2021-12-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114181865A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李鵬;葉雨婷;陳鵬澤;馬天浩;曹宇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 海南師范大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市創(chuàng)富知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44367
• 代理人: 何秉軒

本發(fā)明公開(kāi)了一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用，屬于菌株研究技術(shù)領(lǐng)域，以番茄為寄主植物，檢測(cè)菌株編號(hào)為HNU24的芽孢菌對(duì)茄雷爾氏菌的防治效果，在接種茄雷爾氏菌前，將番茄幼苗從土中輕輕取出后，在HNU24的菌懸液中浸泡5分鐘后，再將其置于具強(qiáng)致病力的茄雷爾氏菌菌懸液中浸泡5min，然后將幼苗再移栽回?zé)o菌土中，于28℃溫室條件下每天觀察并統(tǒng)計(jì)番茄青枯病的發(fā)病情況。該對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用，結(jié)果表明，接種茄雷爾氏菌前經(jīng)過(guò)蘸取生防菌HNU24，青枯病的發(fā)病率可下降50％左右，從而保證了該芽孢菌對(duì)茄雷爾氏菌具有高效拮抗作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于菌株研究技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

茄雷爾氏菌即茄科雷爾氏菌，是一種引發(fā)植物細(xì)菌性青枯病的毀滅性細(xì)菌病害，茄雷爾氏菌的分布范圍廣泛，在我國(guó)南方各省市均有嚴(yán)重發(fā)生。茄雷爾氏菌的寄主廣泛，可以侵染44個(gè)科數(shù)百種植物，對(duì)農(nóng)業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。

為此，我們選用了一種芽孢菌，并檢測(cè)其對(duì)茄雷爾氏菌是否有高效拮抗作用，來(lái)挽回茄雷爾氏菌對(duì)農(nóng)業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用，以解決上述背景技術(shù)中提出的問(wèn)題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，該芽孢菌平板拮抗的方法包括以下步驟：

S1、將融化后的TTC培養(yǎng)基降至一定溫度后將一定量茄雷爾氏菌與培養(yǎng)基一起混合；

S2、在每一個(gè)平皿上均倒入25ml混合后的培養(yǎng)基；

S3、待平板徹底凝固后在平板上打孔；

S4、在每個(gè)孔中加入20μL的芽孢菌生防菌液，生防菌液的菌株編號(hào)為 HNU24；

S5、將平板放置于28℃恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)；

S6、培養(yǎng)后設(shè)置進(jìn)行3次重復(fù)測(cè)量，測(cè)定抑菌圈的直徑；

S7、經(jīng)過(guò)多次平板拮抗實(shí)驗(yàn)，觀察HNU24對(duì)茄雷爾氏菌的拮抗效果；

S8、對(duì)HNU24使用16S rDNA通用引物進(jìn)行基因測(cè)序。

進(jìn)一步優(yōu)化本技術(shù)方案，所述S3中，打孔工作采用打孔器進(jìn)行，所述打孔器的打孔直徑為7mm。

進(jìn)一步優(yōu)化本技術(shù)方案，所述S5中，恒溫培養(yǎng)箱的培養(yǎng)時(shí)間為48h。

進(jìn)一步優(yōu)化本技術(shù)方案，所述S8中，將測(cè)序結(jié)果置于NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行序列比對(duì)，HNU24屬于Bacillus sp.。

一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌的應(yīng)用，選用上述的一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，以番茄為寄主植物，檢測(cè)菌株編號(hào)為 HNU24的芽孢菌對(duì)茄雷爾氏菌的防治效果，在接種茄雷爾氏菌前，將番茄幼苗從土中輕輕取出后，在HNU24的菌懸液中浸泡5分鐘后，再將其置于具強(qiáng)致病力的茄雷爾氏菌菌懸液中浸泡5min，然后將幼苗再移栽回?zé)o菌土中，于28℃溫室條件下每天觀察并統(tǒng)計(jì)番茄青枯病的發(fā)病情況。

進(jìn)一步優(yōu)化本技術(shù)方案，所述的番茄幼苗為出苗后30天的番茄苗。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用，具備以下有益效果：

該對(duì)茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應(yīng)用，通過(guò)多次的平板拮抗實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證以及以番茄為寄主植物，檢測(cè)HNU24對(duì)茄雷爾氏菌的防治效果，結(jié)果表明，接種茄雷爾氏菌前經(jīng)過(guò)蘸取生防菌HNU24，青枯病的發(fā)病率可下降 50％左右，從而保證了該芽孢菌對(duì)茄雷爾氏菌具有高效拮抗作用。

附圖說(shuō)明