[發明專利]一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌及其應用

在審

• 申請號: 202111575916.6
• 申請日: 2021-12-21
• 公開（公告）號: CN114181865A
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 李鵬;葉雨婷;陳鵬澤;馬天浩;曹宇
• 申請（專利權）人: 海南師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 深圳市創富知識產權代理有限公司 44367
• 代理人: 何秉軒

1.一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，其特征在于，該芽孢菌平板拮抗的方法包括以下步驟：

S1、將融化后的TTC培養基降至一定溫度后將一定量茄雷爾氏菌與培養基一起混合；

S2、在每一個平皿上均倒入25ml混合后的培養基；

S3、待平板徹底凝固后在平板上打孔；

S4、在每個孔中加入20μL的芽孢菌生防菌液，生防菌液的菌株編號為HNU24；

S5、將平板放置于28℃恒溫培養箱進行培養；

S6、培養后設置進行3次重復測量，測定抑菌圈的直徑；

S7、經過多次平板拮抗實驗，觀察HNU24對茄雷爾氏菌的拮抗效果；

S8、對HNU24使用16S rDNA通用引物進行基因測序。

2.根據權利要求1所述的一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，其特征在于，所述S3中，打孔工作采用打孔器進行，所述打孔器的打孔直徑為7mm。

3.根據權利要求1所述的一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，其特征在于，所述S5中，恒溫培養箱的培養時間為48h。

4.根據權利要求1所述的一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，其特征在于，所述S8中，將測序結果置于NCBI數據庫中進行序列比對，HNU24屬于Bacillus sp.。

5.一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌的應用，選用權利要求1-4所述的一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌，其特征在于，以番茄為寄主植物，檢測菌株編號為HNU24的芽孢菌對茄雷爾氏菌的防治效果，在接種茄雷爾氏菌前，將番茄幼苗從土中輕輕取出后，在HNU24的菌懸液中浸泡5分鐘后，再將其置于具強致病力的茄雷爾氏菌菌懸液中浸泡5min，然后將幼苗再移栽回無菌土中，于28℃溫室條件下每天觀察并統計番茄青枯病的發病情況。

6.根據權利要求1所述的一種對茄雷爾氏菌有高效拮抗作用的芽孢菌的應用，其特征在于，所述的番茄幼苗為出苗后30天的番茄苗。