[發明專利]一種從細弱紅翎菜綜合提取藻膽蛋白及卡拉膠的方法

有效

• 申請號: 202111566710.7
• 申請日: 2021-12-20
• 公開（公告）號: CN114702561B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發明（設計）人: 王廣策;羌璽;王立軍;王旭雷;牛建峰;閆舒恒
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所;南通中科海洋科學與技術研究發展中心
• 主分類號: C07K14/405
• 分類號: C07K14/405;C07K1/30;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C08B37/00
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種從細弱紅翎菜綜合提取藻膽蛋白及卡拉膠的方法，其特征在于：

具體步驟如下：

A.提取純化藻膽蛋白:

(1)將細弱紅翎菜按料液質量體積比1：1~1：1.5加入去離子水破壁粉碎，放入-20~-30°C的冰箱里，反復凍融3~5次，用50-200目過濾去除藻渣，濾液為制得藻膽蛋白粗提液；

(2)將藻膽蛋白粗提液中加入藻膽蛋白粗提液體積的60%~100%的硫酸銨進行鹽析；

(3)將步驟（2）中的鹽析液在轉速4000~6000?rpm，溫度2~8?°C條件下，離心5~10?min，去除上清液，收集沉淀加100~300?mL去離子水溶解，將得到的溶液放入透析袋中透析，每隔2~4?h換水，至透析液內不含硫酸根；

(4)將步驟（3）的透析液以1~3?mL/min速度上樣至苯基-瓊脂糖膨化柱，0.5?M硫酸銨洗脫至無色，將膨化柱上吸附的雜蛋白和未被吸附的藻紅蛋白清洗干凈，再以0.2?M~0.025?M硫酸銨梯度洗脫藻紅蛋白，收集洗脫液；

(5)將洗脫液透析除鹽后，濃縮至葡聚糖G-150凝膠層析柱柱體積1%~5%，上樣，用0.05M?磷酸緩沖液洗脫，收集藻紅蛋白洗脫液；即得到純化的藻紅蛋白；

(6)純化得到的藻紅蛋白進行紫外吸收光譜、熒光光譜、SDS-PAGE、Native-PAGE測定；

B.?從提取藻膽蛋白的藻渣中提取卡拉膠:

(1)將提取過藻膽蛋白的藻渣放入容器中，按藻渣的濕重料液的質量體積比1：1~1：5加入質量濃度為4%~8%的氫氧化鉀堿液，50~80?°C，水浴1~3?h；

(2)用50-200目篩絹過濾，用濃度0.5%醋酸酸洗藻渣至pH7~8，隨后用0.5%次氯酸鈉漂白藻渣，再用去離子水洗滌藻渣至中性；

(3)再將藻渣與去離子水按料液質量體積比1：1~1：5?g：mL；70~100?°C，水浴2~4?h；

(4)趁熱過濾步驟（3）提取液，常溫凝固后，冷凍24~72?h，融化去水，50~70?°C烘干，即得到卡拉膠；

(5)制得的卡拉膠進行得率、硫酸酯基、紅外光譜的測定。

2.如權利要求1所述的一種從細弱紅翎菜綜合提取藻膽蛋白及卡拉膠的方法，其特征在于：所述的葡聚糖G-150凝膠要先用去離子水浸泡24?h以上，充分溶脹。

3.如權利要求1所述的一種從細弱紅翎菜綜合提取藻膽蛋白及卡拉膠的方法，其特征在于：所述的磷酸緩沖液的pH=7。

4.如權利要求1所述的一種從細弱紅翎菜綜合提取藻膽蛋白及卡拉膠的方法，其特征在于：所述的步驟（1）中的過濾用100目細篩絹過濾去除藻渣。