[發(fā)明專利]一種鈣離子通道阻斷藥物的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111560143.4
• 申請(qǐng)日: 2021-12-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114371154A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳寒曦;徐睿航;賈睿;于殿江;魏雙艷;翟玉鳳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G01N1/28
• 代理公司: 北京盛凡佳華專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11947
• 代理人: 李沖

1.一種鈣離子通道阻斷藥物的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、Neuro-2a使用高糖HDMEM培養(yǎng)基在六孔板中培養(yǎng)24小時(shí)，設(shè)立空白、損傷、加藥組；

S2、倒掉HDMEM培養(yǎng)基，加入含GV-58的培養(yǎng)基處理三小時(shí)，激活鈣離子通道，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度上升，建立損傷模型；

S3、再加入不同濃度的ω-芋螺毒素GVIA阻斷鈣離子通道使細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度下降；

S4、鈣離子熒光探針，處理一小時(shí)，PBS沖洗，胰蛋白酶消化2分鐘，收集離心，使用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)480nm激發(fā)波長(zhǎng)下的發(fā)射波長(zhǎng)，與空白組比較，計(jì)算相對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度。