[發明專利]一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法

在審

• 申請號: 202111543037.5
• 申請日: 2021-12-16
• 公開（公告）號: CN114317278A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 歐瑩;秦宇;楊海麟;馮守帥;張玲
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/6434;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 趙巧娜

本發明公開了一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法，屬于微生物發酵生產領域。本發明的利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法，以酒糟處理液為主要氮源進行發酵生產，經酒糟的浸泡、煮沸、過濾、離心、發酵培養基的配置、發酵條件的設定、裂殖壺菌收集和干燥制得裂殖壺菌干粉以及藻油的提取。本發明是以酒糟處理液作為主要氮源的裂殖壺菌發酵生產全新工藝，用酒糟處理液代替傳統培養基中價格昂貴的胰蛋白胨和酵母粉，降低了發酵生產的成本，促進了裂殖壺菌的生長和DHA積累，同時有效的解決了白酒廠廢棄酒糟堆砌所導致的環境問題；很好的解決現有技術工藝所存在的高生產成本問題，實現了酒糟的高值化利用。

技術領域

本發明涉及一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法，屬于微生物發酵生產領域。

背景技術

白酒酒糟是白酒生產過程中的副產物，在白酒生產過程中主要消耗的是糧食中的淀粉，剩下的蛋白質和脂肪以及參與發酵的菌體蛋白都留在酒糟中，因此，酒糟中的粗蛋白和粗脂肪含量較高。直接將酒糟丟棄不僅是一種資源的浪費，而且也會造成環境污染。目前國內對白酒酒糟最普遍的處理方式是作為飼料原料，但因需對其進行干燥處理，不僅會造成效益低下等問題，還會消耗大量能源。

多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)是維持人體生理代謝的重要物質。其中DHA一直以來就有“腦黃金”的美譽，是人體必不可缺的一種不飽和脂肪酸，對人體的神經系統發育、心血管維護、抗癌、抗炎等方面均有十分重要的功效。DHA可促進嬰兒大腦的發育和視網膜感光細胞的成熟；DHA缺乏會導致新生兒智力發育的延滯和中樞神經系統代謝的紊亂。由于人體自身無法合成DHA，孕婦需多食用富含DHA的食物以滿足嬰幼兒大腦和中樞神經系統發育的需求。

傳統上，DHA多是從深海魚油中獲得。但會受到季節、氣溫等因素的影響，生產出的DHA藻油品質不穩定；其次魚油有難聞的魚腥味，不容易接受。再次魚油中易出現有害的有機物和重金屬的積累。隨著漁業資源的日益緊張，傳統的DHA資源已無法滿足日益增長的市場需求。因此，開發DHA的新生資源已成為新的研究熱點。

裂殖壺菌(Schizochytrium.sp)，又稱裂壺藻，是一種海洋真菌，屬于網粘菌門、網粘菌綱、破囊壺菌目、破囊弧菌科、裂殖壺菌屬、裂殖壺菌。裂殖壺菌菌體含油量極高，可達到干菌體的50％以上，且脂肪酸組成較為簡單，其中DHA可達到總脂肪酸35％以上。目前，裂殖壺菌發酵一般是以胰蛋白胨、酵母粉作為主要氮源，葡萄糖等糖類物質作為碳源，生產成本較高。例如，公開于蔣曉燕，裂殖壺菌Schizochytrium sp.20888產DHA培養條件優化論文當中，采用胰蛋白胨和酵母粉為氮源，制備得到的DHA含量為總油脂含量的33.68％，但是胰蛋白胨和酵母粉作為氮源的成本較高，在工業生產中無法實現大規模應用。

因此，尋求一種高產量、低成本的裂殖壺菌的工業化發酵生產新工藝是本發明所面臨的新課題。

發明內容

為了解決現有技術當中存在的采用裂殖壺菌生產DHA的成本高的問題，本發明提供了一種低成本、高產量的裂殖壺菌發酵生產DHA的方法。

本發明提供了一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法，以酒糟處理液替代胰蛋白胨作為低成本氮源發酵培養裂殖壺菌生產DHA藻油，所述培養基為：將碳源50～100g/L，海水晶15～25g/L，谷氨酸鈉10～30g/L，磷酸二氫鉀1.5～5g/L，硫酸鎂5～8g/L，硫酸鈉8～15g/L，氯化鈣0.2～0.8g/L，VB₁ 0.05～0.2g/L，VB₆ 0.05～0.2g/L，VB₁₂ 0.001～0.003g/L添加至含有酒糟處理液的水溶液中制備得到；

所述酒糟處理液的制備方法為：將白酒酒糟在水中浸泡后煮沸，過濾，制備得到酒糟處理液；所述碳源為葡萄糖、果糖、麥芽糖、木糖、甘油中的一種或多種。

在本發明的一種實施方式中，所述酒糟處理液在水溶液當中的比例為：40％～100％。