[發明專利]一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法

在審

• 申請號: 202111543037.5
• 申請日: 2021-12-16
• 公開（公告）號: CN114317278A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 歐瑩;秦宇;楊海麟;馮守帥;張玲
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/6434;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 趙巧娜

1.一種利用酒糟處理液培養裂殖壺菌的方法，其特征在于，以酒糟處理液替代胰蛋白胨作為低成本氮源發酵培養裂殖壺菌生產DHA藻油，具體包括：將碳源50～100g/L，海水晶15～25g/L，谷氨酸鈉10～30g/L，磷酸二氫鉀1.5～5g/L，硫酸鎂5～8g/L，硫酸鈉8～15g/L，氯化鈣0.2～0.8g/L，VB₁ 0.05～0.2g/L，VB₆ 0.05～0.2g/L，VB₁₂ 0.001～0.003g/L添加至含有酒糟處理液的水溶液中制備得到；

所述酒糟處理液的制備方法為：將白酒酒糟在水中浸泡后經煮沸、過濾，制備得到酒糟處理液；所述碳源為葡萄糖、果糖、麥芽糖、木糖、甘油中的一種或多種。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述酒糟處理液的制備方法為：

(1)除去新鮮酒糟的水分，使其含水量為8～18％；

(2)向將步驟(1)得到的酒糟中添加水浸泡4～8h，得到酒糟溶液；其中酒糟和水的質量比為(1:5)～(1:10)；

(3)將步驟(2)得到的酒糟溶液加熱至煮沸，并維持1～5min后進行過濾，得到濾液，將濾液離心后收集上清液，即為酒糟處理液。

3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述酒糟處理液在水溶液當中的比例為：40％～100％。

4.一種低成本制備含有DHA的藻油的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)將權利要求1～3任一所述的培養基的pH調節至5.5～8.0，制備得到發酵培養基，所述發酵培養基采用低成本的酒糟處理液代替傳統培養基氮源胰蛋白胨，其成本經核算僅為以胰蛋白胨為氮源的傳統培養基的1/3～1/2；

(2)將裂殖壺菌種子液添加至所述發酵培養基中進行發酵；

(3)采用有機溶劑對發酵結束之后的裂殖壺菌菌體進行萃取，制備得到藻油。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述裂殖壺菌為裂殖壺菌ATCC20888。

6.權利要求4或5的方法制備得到的含有DHA的藻油。

7.一種培養裂殖壺菌的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)將活化后的單菌落接種至種子培養基中進行培養，制備得到種子液；

(2)將權利要求1～3任一所述的培養基的pH調節至5.5～8.0，制備得到發酵培養基，將步驟(1)制備得到的種子液添加至發酵培養基中進行發酵。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述種子液在發酵培養基中的添加量為：5％～15％。

9.權利要求1～3任一所述的培養基，或權利要求4～5任一所述的制備含有DHA的藻油的方法，或權利要求6所述的藻油，或權利要求7或8所述的方法在制備DHA或含有DHA的產品中的應用。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述產品為食品、藥品或保健品。