[發(fā)明專利]一種大曲發(fā)酵力檢測培養(yǎng)基的制備方法及應(yīng)用其檢測大曲發(fā)酵力的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111535298.2
• 申請日: 2021-12-15
• 公開（公告）號: CN114480551A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉玉濤;張夢夢;李小杰;胥鑫鈺;吳玉軒;崔新瑩;秦炳偉
• 申請（專利權(quán)）人: 濟(jì)南趵突泉釀酒有限責(zé)任公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;G01N21/31
• 代理公司: 東莞市卓易專利代理事務(wù)所(普通合伙) 44777
• 代理人: 陳能春

1.一種大曲發(fā)酵力檢測培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

步驟1：將高粱和蒸餾水按照質(zhì)量比為1：5進(jìn)行混合，后放入水浴鍋中由室溫升溫至100攝氏度蒸煮1小時，隨后冷卻至60攝氏度；

步驟2：取與高粱質(zhì)量比為1：40的淀粉酶和與高粱質(zhì)量比為1：100的糖化酶加入步驟1中60攝氏度的水浴鍋中水浴處理；

步驟3：水浴結(jié)束后，將溫度升溫至90攝氏度，過濾取濾液，將濾液糖度調(diào)至12.7°Bx，后滅菌處理即得大曲發(fā)酵力檢測培養(yǎng)基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大曲發(fā)酵力檢測培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：步驟2中所述得水浴處理時間為3小時。

3.一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的檢測大曲發(fā)酵力方法，其特征在于：具體包括以下步驟；

S1：發(fā)酵；將與培養(yǎng)基質(zhì)量比為1：100的大曲接入至滅菌后的大曲發(fā)酵力培養(yǎng)基中，通過注入15mL2.61mol/L濃硫酸的發(fā)酵栓進(jìn)行安裝密封，后置于37攝氏度培養(yǎng)箱中發(fā)酵72小時；

S2：發(fā)酵液處理；將S1中發(fā)酵完成后的混合物進(jìn)行過濾，將發(fā)酵濾液移至蒸餾燒瓶中，隨后調(diào)整pH值至中性；

S3：蒸餾；向S2調(diào)至中性的發(fā)酵濾液中添加沸石，通過蒸餾裝置進(jìn)行蒸餾，餾出液通過100mL容量瓶收集且用冰浴進(jìn)行冷卻，緩慢蒸餾至刻度線時取下，放入20攝氏度水浴30分鐘，用蒸餾水定容至刻度線，搖勻即得待檢測樣品；

S4：檢測待測樣品酒精含量；取1mL制備好的待測樣品利用分光光度計法檢測發(fā)酵力；

S5：計算；按照下述公式計算酒曲發(fā)酵力：

X＝(y＊100)/1000；

式中，X為待測樣品酒精的含量，單位mL乙醇·(g大曲·72h)；y為利用分光光度計法獲取的乙醇含量，單位為uL/25mL；100為1g大曲發(fā)酵完全后，蒸餾出來的酒精溶液，單位mL；1000為單位換算系數(shù)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種檢測大曲發(fā)酵力的方法，其特征在于：S4中所述的分光光度計法的具體步驟如下：

S41：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；

將重鉻酸鉀溶液與濃硫酸按照體積比為4：5混合均勻得到混合溶液，后分別加入與重鉻酸鉀溶液體積比為(0～1.25)：2的乙醇溶液進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)十分鐘后加水混勻，獲得多組對應(yīng)加入乙醇溶液的檢測藥品；將反應(yīng)得到多組對應(yīng)加入乙醇溶液的混合溶液分別于585nm波長處測定其吸光度，根據(jù)每組乙醇溶液的含量和對應(yīng)吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

通過獲取的標(biāo)準(zhǔn)曲線獲取回歸方程，該回歸方程的表達(dá)式為：y＝57.8x-0.2194；

相關(guān)系數(shù)r＝0.99924；

式中，y為乙醇含量，單位為uL/25mL；x為吸光度；

S42：將待測樣品放入分光光度計中利用獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行樣品檢測。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種檢測大曲發(fā)酵力的方法，其特征在于：

S41中所述乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：吸取2mL優(yōu)級純級別的無水乙醇，于100mL容量瓶中，加入50mL蒸餾水，搖勻，再繼續(xù)用蒸餾水定容至刻度線，搖勻即得乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種檢測大曲發(fā)酵力的方法，其特征在于：

S41中所述重鉻酸鉀溶液得配制：稱取10克分析純級別的重鉻酸鉀，用水溶解，并定容至250mL，即得重鉻酸鉀溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種檢測大曲發(fā)酵力的方法，其特征在于：

S41中所述濃硫酸得純級含量為95～98％。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種檢測大曲發(fā)酵力的方法，其特征在于：

S2中所述的發(fā)酵液通過濃度為0.1mol/L的NaOH溶液調(diào)整pH值至中性。