[發(fā)明專利]一種微生物防治三七根腐病劑的制備方法及其應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202111533266.9 | 申請日： | 2021-12-15 |
| 公開（公告）號： | CN114250176B | 公開（公告）日： | 2023-09-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李一青;胡林芳;苗翠蘋 | 申請（專利權(quán)）人： | 云南大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;A01N63/28;A01P3/00;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 650091 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 微生物 防治 三七 根腐病劑 制備 方法 及其 應用 | ||
1.一種微生物防治三七根腐病劑的制備方法，其特征在于該制備方法包括以下步驟:
(1)試管種培養(yǎng)：將保藏號為CCTCC?NO：M2018221的鏈霉菌YIM?PH20246(Streptomycessp.YIM?PH20246)菌株接種到試管固體培養(yǎng)基斜面上，于28℃的溫度下培養(yǎng)6天，獲得菌株試管種；
其中，固體培養(yǎng)基配方為：酵母粉4.0g；葡萄糖4.0g；麥芽膏5.0g；復合維生素3.5mg；瓊脂粉15.0g；水1000mL；pH?7.2；
(2)培養(yǎng)液體種子：采用500mL三角瓶搖瓶培養(yǎng)，先配制液體種子培養(yǎng)基，在每個三角瓶中裝入100mL液體培養(yǎng)基，于120℃的溫度下滅菌30分鐘，冷卻后接入1cm2大的菌株試管種，于28℃的溫度下于轉(zhuǎn)速為220rpm的搖床上培養(yǎng)2天，獲得液體種子；
其中，液體種子培養(yǎng)基配方為酵母粉4.0g；葡萄糖4.0g；麥芽膏5.0g；復合維生素3.5mg；水1000mL；pH?7.2；
(3)制備微生物防治三七根腐病劑：采用1000mL三角瓶搖瓶培養(yǎng)，先配制液體發(fā)酵培養(yǎng)基，在每個三角瓶中裝入200mL液體發(fā)酵培養(yǎng)基，于120℃的溫度下滅菌30分鐘，冷卻后接入20mL上述步驟(2)中獲得的液體種子，在28℃的溫度下于轉(zhuǎn)速為220rpm的搖床上培養(yǎng)6天后獲得菌株發(fā)酵產(chǎn)物，在發(fā)酵產(chǎn)物中加入等體積乙醇，經(jīng)轉(zhuǎn)速為180rpm的搖床振蕩6小時后濾去菌絲體，蒸干上清液中的乙醇得到菌株發(fā)酵提取物，將該發(fā)酵提取物加水稀釋到原發(fā)酵液濃度，即為試驗用微生物防治三七根腐病劑；
其中，液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：葡萄糖30.0g，淀粉10.0g，蛋白胨5.0g，酵母膏5.0g，K2HPO4?0.5g，MgSO4·7H2O?0.5g，CaCO3?2.0g，水1000mL；pH7.0。
2.權(quán)利要求1所述方法制備得到的微生物防治三七根腐病劑在防治三七根腐病中的用途。
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