[發(fā)明專利]基于UPLC-QTOF-MS技術(shù)結(jié)合UNIFI快速篩查中草藥中有毒生物堿的方法

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• 申請日: 2021-12-15
• 公開（公告）號: CN114200059A
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何聿;李慧晨;余艷檳
• 申請（專利權(quán)）人: 福州大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 林文弘;蔡學俊

1.一種基于UPLC-QTOF-MS技術(shù)結(jié)合UNIFI快速篩查中草藥中有毒生物堿的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟a）將干燥中草藥經(jīng)粉碎磨成粉末狀，過篩；將中草藥粉末與溶劑混合，室溫下超聲萃取，隨后離心，上清液經(jīng)有機濾膜過濾，得到樣品，存于樣品瓶中準備進樣；

步驟b）利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀對步驟a）制備好的樣品進行分離檢測，得到生物堿成分物質(zhì)峰，用UNIFI軟件對所述物質(zhì)峰進行定性分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a）中，所述溶劑為甲醇，所述中草藥粉末與溶劑的比例為1:100 m/v。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a）中，所述超聲萃取時間為30 min，超聲功率為200 W，超聲頻率為40 kHz。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a）中，所述離心條件為10000 rpm、10min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a）中，所述上清液依次經(jīng)0.45 μm有機濾膜和0.22 μm有機濾膜過濾。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b）中，所述色譜分離的條件為：色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C₁₈，色譜柱規(guī)格為2.1 mm×100 mm，1.7 μm；進樣量1 μL，流速0.2mL/min，柱溫40 ℃；洗脫系統(tǒng)流動相為：流動相A為含10 mM甲酸銨的水，流動相B為甲醇；梯度洗脫的程序為：0-1 min，95% A；1-3 min，95% A→ 70% A；3-12 min，75% A→55% A；12-20 min，55% A→ 1% A；20-25min，1% A；25-25.1min，1% A-95% A；25.1-30min，95% A。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b）中，所述質(zhì)譜檢測的條件為：電噴霧離子源，MSE正離子掃描模式；氮氣為錐孔反吹氣、脫溶劑氣和霧化氣，氬氣為碰撞氣；毛細管電壓2.00 kV，錐孔電壓40 V，離子源溫度150 ℃，脫溶劑氣流量600 L/h，脫溶劑氣溫度350 ℃，錐孔氣流量50 L/h，低能量碰撞電壓6 V，高能量碰撞電壓30～50 V，質(zhì)量掃描范圍50～1200 Da，掃描時間0.250 s，掃描時間間隔0.250 s。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b）中，所述UNIFI軟件的型號為WatersUNIFI 1.8。

9.如權(quán)利要求1所述的方法在鑒別檢驗中草藥樣品中生物堿成分中的應(yīng)用。