[發明專利]一種保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法及其標準指紋圖譜

有效

• 申請號: 202111514128.6
• 申請日: 2021-12-13
• 公開（公告）號: CN114184719B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 黃慧蓮;童猛輝;鄭琴;劉均正;黃小英;譚閩懷;王芳;伍振峰;楊明;查青林;曹嵐;劉毅
• 申請（專利權）人: 江西和盈藥業有限公司;江西中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 南昌青遠專利代理事務所(普通合伙) 36123
• 代理人: 劉愛芳

1.一種保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）根據保元湯處方制備保元湯煎液；

（2）取保元湯煎液，制成供試品溶液；供試品溶液的制備方法為：量取保元湯煎液50ml，然后4000r/min離心10min，量取10mL上清液，加在C?18?固相萃取小柱上，吸附后，用雙蒸水10mL洗脫，棄去，體積分數為15%的甲醇水溶液10mL洗脫，棄去，最后用純甲醇20mL洗脫并收集，蒸干，加甲醇定容至5mL容量瓶中，搖勻，過濾，即得；

（3）精確稱取人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸銨、6-姜辣素對照品，配成混合對照品溶液；

（4）將供試品溶液和混合對照品溶液注入高效液相色譜儀測定，得到保元湯指紋圖譜；其中高效液相色譜儀檢測波長為200-205nm和250-260nm；流動相A：100%乙腈，流動相B：體積分數為0.05-0.2%的磷酸水溶液，色譜條件為：

采用梯度洗脫：0～5min，14%～17%乙腈，86%～83%磷酸水溶液；

5～12min，17%～19%乙腈，83%～81%磷酸水溶液；

12～59min，19%～25%乙腈，81%～75%磷酸水溶液；

59～75min，25%～30%乙腈，75%～70%磷酸水溶液；

75～120min，30%～47%乙腈，70%～53%磷酸水溶液；

流速：1.0mL/min；柱溫：25℃；進樣量10μL。

2.根據權利要求1所述的保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法，其特征在于：步驟（4）中，高效液相色譜儀的檢測波長為203nm和254nm。

3.根據權利要求1或2所述的保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法，其特征在于：步驟（1）中，保元湯煎液的制備方法如下：將一份保元湯的處方藥材用水煎煮兩次，一煎：加水300mL，煎至120mL，過濾；二煎：加水225mL，煎至105mL，過濾，合并兩次煎液225mL備用。

4.根據權利要求3所述的保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法，其特征在于：保元湯原料藥材包括：人參、黃芪、甘草、肉桂和生姜。

5.根據權利要求1所述的保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法建立標準指紋圖譜，其特征在于，按照所述的保元湯的雙波長指紋圖譜建立方法對不同產地的10-20個批次的保元湯藥材進行測定，得到不同產地10-20批次保元湯煎液的指紋圖譜，導入2012版“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統”確定保元湯的指紋圖譜的共有峰，這些共有峰構成了保元湯的指紋特征，可作為保元湯的標準指紋圖譜。