[發(fā)明專(zhuān)利]一種類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111502473.8
• 申請(qǐng)日: 2021-12-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114380887A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳浩明;胡峰;俞金釗;袁慧星;尹傳龍;唐洋明;余品香
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K5/083
• 分類(lèi)號(hào): C07K5/083;C07K1/02;C07K1/06;C07K1/10
• 代理公司: 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈;李玉娜

本發(fā)明公開(kāi)了一種類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法，包括：合成化合物Z?β?Ala?Pro?OH；合成化合物Fmoc?DAB(Z)?NHBzl，脫除Fmoc保護(hù)基，得到化合物NH₂?DAB(Z)?NHBzl；以化合物Z?β?Ala?Pro?OH和NH₂?DAB(Z)?NHBzl為原料，合成化合物Z?β?Ala?Pro?DAB(Z)?NHBzl，脫除Z保護(hù)基，得到化合物H?β?Ala?Pro?DAB?NHBzl·2HBr。本發(fā)明提供的類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法采用2+2片段合成策略，工藝路線(xiàn)短，操作簡(jiǎn)便快捷，并且兩片段能夠通過(guò)析晶分離，提高了合成的效率，利于工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于多肽合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法。

背景技術(shù)

類(lèi)蛇毒三肽(H-β-Ala-Pro-DAB-NH-Bzl)是一種模擬蛇毒毒素Waglerin I活性的三肽，Waglerin I發(fā)現(xiàn)于Temple Viper毒蛇的毒液，已被證明可抑制乙酰膽堿與乙酰膽堿受體的結(jié)合，從而抑制肌肉運(yùn)動(dòng)。類(lèi)蛇毒肽是DSM荷蘭皇家帝斯曼集團(tuán)全資子公司PENTAPHARM開(kāi)發(fā)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與毒蛇血清相似，具有抑制神經(jīng)肌肉收縮，撫平肌膚皺紋的功能。應(yīng)用于化妝品中，類(lèi)蛇毒肽在減少動(dòng)力性皺紋方面的功效是類(lèi)肉毒桿菌的5倍，具有優(yōu)秀的光滑肌膚、迅速祛皺的性能，分子結(jié)構(gòu)如下所示：

目前，合成類(lèi)蛇毒肽的方法主要有以下幾種

(1)液相逐個(gè)縮合：如專(zhuān)利CN 107936108 A，該方案以甲酯保護(hù)的氨基酸為原料，逐個(gè)縮合，最后進(jìn)行C端修飾芐胺。該方法不斷偶聯(lián)、水解脫保護(hù)，步驟繁瑣，偶聯(lián)到后面工藝收率和純度較低；此外，該方法用到了兩次水解反應(yīng)，Pro-OMe和Dab-OMe的水解，容易發(fā)生消旋；另外，所用原料均需要采用甲酯保護(hù)的氨基酸，成本較高。

(2)固液相結(jié)合方式：該類(lèi)方法一般先采用2-CTC Resin固相合成全保護(hù)肽Boc-β-Ala-Pro-DAB(Boc)-OH或Fmoc-β-Ala-Pro-DAB(Boc)-OH，再在液相環(huán)境下與芐胺縮合(如專(zhuān)利CN 103570804 B)。該工藝粗肽純度較高，但是使用2-CTC Resin價(jià)格較高，而且氨基酸投料倍數(shù)基本都是大大過(guò)量，成本高，另外，固相合成在規(guī)模上也受限。

(3)液相片段合成：如專(zhuān)利CN 107857797 A，該方法是合成片段H-Pro-DAB(Boc)-NH-Bzl，然后再與Boc-β-Ala-OH反應(yīng)得到全保護(hù)肽。該片段合成策略簡(jiǎn)便易行，但使用的原料H-Dab(Boc)-OH價(jià)格較貴；另外，在Fmoc-Pro-Dab(Boc)-OH與芐胺偶聯(lián)過(guò)程中，因Dab(Boc)主鏈氨基酸并非是氧羰基類(lèi)保護(hù)基，在縮合反應(yīng)中，容易產(chǎn)生Dab的消旋，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有較大影響。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法。

本發(fā)明提供一種類(lèi)蛇毒三肽的液相片段合成方法，包括如下步驟：

合成化合物Z-β-Ala-Pro-OH；

合成化合物Fmoc-DAB(Z)-NHBzl；

脫除化合物Fmoc-DAB(Z)-NHBzl的Fmoc保護(hù)基，得到化合物NH₂-DAB(Z)-NHBzl；

以化合物Z-β-Ala-Pro-OH和NH₂-DAB(Z)-NHBzl原料，合成化合物Z-β-Ala-Pro-DAB(Z)-NHBzl；

脫除化合物Z-β-Ala-Pro-DAB(Z)-NHBzl的Z保護(hù)基，得到化合物H-β-Ala-Pro-DAB-NHBzl·2HBr；