[發明專利]一種生產黃原膠專用蛋白胨的制備方法

在審

• 申請號: 202111491191.2
• 申請日: 2021-12-08
• 公開（公告）號: CN114277075A
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發明（設計）人: 李懷濤;李懷深;張學艷
• 申請（專利權）人: 淄博錦源生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;C12P19/06;C12R1/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種黃原膠發酵生產專用蛋白胨的制備方法，包括以下步驟：新鮮魚骨與水混合，并經過高溫高壓蒸煮成骨湯；將骨湯倒入酶解罐，并加入復合酶進行攪拌酶解；酶解結束后加入酸性調節劑，將酶解罐內pH調節至弱酸性，使其產生懸浮物和沉淀物；取懸浮物和沉淀物中間的清液進行過濾，添加活性碳粉末再經離心過濾、噴霧干燥機干燥成粉，得到生產黃原膠專用的蛋白胨。本發明通過新鮮魚骨制備蛋白胨和通過改變酶解工藝，使得制得的蛋白胨具有較高含量的氨基酸態氮以及適用于黃原膠菌株發酵的氨基酸組成，使黃原膠發酵產率及質量均得到提高。

技術領域

本發明涉及蛋白胨技術領域，更具體地說，特別涉及一種生產黃原膠專用蛋白胨的制備方法。

背景技術

黃原膠，又名漢生膠，是由野油菜黃單胞桿菌以碳水化合物為主要原料( 如玉米淀粉) 經發酵工程生產的一種作用廣泛的微生物胞外多糖。它具有獨特的流變性，良好的水溶性、對熱及酸堿的穩定性、與多種鹽類有很好的相容性，作為增稠劑、懸浮劑、乳化劑、穩定劑，可廣泛應用于食品、石油、醫藥等20多個行業，是目前世界上生產規模最大且用途極為廣泛的微生物多糖，目前的黃原膠制備過程中，蛋白胨作為發酵氮源是必不可少的，現有的蛋白胨主要通過植物蛋白源、動物蛋白源或微生物蛋白源通過正常的酶解制備而來，關注的主要是總氮，并未針對黃原膠發酵菌株對不同氨基酸的喜好進行酶解工藝的針對性開發，所以黃原膠發酵產率及產品質量均有較大的提升空間。

發明內容

本發明的目的在于提供一種生產黃原膠專用蛋白胨的制備方法。

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案如下：一種生產黃原膠專用蛋白胨的制備方法，包括以下步驟：

S1、新鮮魚骨與水按照重量比1：4混合，并經過高溫高壓蒸煮成骨湯；

S2、將骨湯倒入酶解罐，并加入0.1%~0.3%胰蛋白酶、0.1%~0.3%氨肽酶和0.1%~0.3%中性蛋白酶進行攪拌酶解；

S3、酶解結束后加入酸性調節劑，將酶解罐內pH調節至弱酸性，并進行升溫和降溫操作，使其產生懸浮物和沉淀物；

S4、取懸浮物和沉淀物中間的清液進行400目濾布過濾，過濾后的液體經1.5KDa超濾膜截留，截留后的液體經真空濃縮至固含量50%，添加活性碳粉末再經離心過濾、噴霧干燥機干燥成粉，得到生產黃原膠專用的蛋白胨。

優選地，步驟S1中壓力為2~3MPa，溫度為100℃~120℃。

優選地，步驟S2中，骨湯倒入酶解罐后需調pH值至7-7.5，溫度50度。

優選地，步驟S2中攪拌分為多次攪拌，第一次先攪10分鐘停5分鐘，第二次攪10分鐘停5分鐘，第三次攪10分鐘停10分鐘，第四次攪10分鐘停10分鐘，第五次攪10分鐘停25分鐘，第六次攪10分鐘停25分鐘。

優選地，步驟S3的具體步驟為：酸性調節劑為醋酸，其將酶解罐內溶液pH值調至5.1-5.3，溶解罐升溫至90℃后慢慢降溫，2-3小時降至45℃~55℃，且降溫過程中不能開攪拌。

優選地，制得的蛋白胨的總氮含量為13.5~15.5%，其中氨基酸態氮含量為2.5~4%。

一種上述蛋白胨的黃原膠制備方法，步驟如下：將該蛋白胨和培養發酵溶液加入發酵罐中，并接種野油菜黃單胞桿菌在pH7.0、溫度28~35℃條件下進行發酵；采用鹽沉淀法對發酵液進行提取，提取得到黃原膠沉析物；在提取的黃原膠沉析物中增加耐熱添加劑，然后經過固液分離、脫水、干燥得到黃原膠。

優選地，培養發酵溶液為玉米淀粉50~60g/L、(K2HPO4?3H2O)3~5g/L、(MgSO4?7H2O)0.1~0.4 g/L、(NH4)2SO4 1~5g/L和檸檬酸2~4g/L的混合液，其中稀釋率n=5。

優選地，鹽沉淀法采用25%氯化鉀溶液。

與現有技術相比，本發明的優點在于：