[發明專利]一種鑒別青海產富硒黑蒜的方法

在審

• 申請號: 202111484055.0
• 申請日: 2021-12-07
• 公開（公告）號: CN114184632A
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 謝寶剛;李蕾;郭隆華;丁寶月;黃振榮;劉兵;金楠;馬玉金
• 申請（專利權）人: 嘉興學院;青海恩露生物科技有限公司
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 馬叢

1.一種鑒別青海產富硒黑蒜的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對已知產地的黑蒜樣品分別進行提取，得到黑蒜提取物；所述已知產地的黑蒜樣品包括青海產富硒黑蒜和其他已知產地黑蒜樣品；所述提取用試劑為甲醇水溶液；

(2)分別獲取所述步驟(1)中黑蒜提取物的核磁共振氫譜，對所述核磁共振氫譜進行歸一化處理，得到核磁全譜數據；

(3)將所述步驟(2)中的核磁全譜數據導入SMICA軟件中，以所述核磁全譜數據作為X值，以產地作為Y值，采用正交偏最小二乘法進行有監督的聚類分析，得到OPLS-DA模型；

(4)采用所述步驟(1)～(2)的方法獲取待確定產地的黑蒜樣品的核磁全譜數據；將所述待確定產地的黑蒜樣品的核磁全譜數據導入步驟(3)所述OPLS-DA模型中進行預測，得到預測得分值；若所述預測得分值大于0.5，則判定所述待確定產地的黑蒜樣品為青海產富硒黑蒜；若所述預測得分值小于0.5，則判定所述待確定產地的黑蒜樣品為其他產地黑蒜。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中其他已知產地黑蒜樣品包括廣東河源、河北衡水、江蘇徐州、山東金鄉和云南大理黑蒜樣品中的一種或幾種。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中提取的方法包括以下步驟：

將所述已知產地的黑蒜樣品分別去皮后進行碾壓，得到泥狀樣品；

將所述泥狀樣品與甲醇水溶液和磷酸鹽緩沖液混合，將所得混合液依次進行渦旋振蕩、超聲和離心，取上清液濃縮至干，得到所述黑蒜提取物。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述甲醇水溶液的體積分數為20～90％；所述泥狀樣品與甲醇水溶液的用量比為0.1g:1～5mL。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為2～8，濃度為0.05～3mol/L；所述泥狀樣品與磷酸鹽緩沖液的用量比為0.1g：20～100μL。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述渦旋振蕩的時間為3～10min；所述超聲的時間為30～60min；所述離心的速度為10000～12000rpm，時間為10～20min；所述濃縮至干的方法為旋轉蒸發，所述旋轉蒸發的溫度為45～50℃，時間為3～5h。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中獲取黑蒜提取物的核磁共振氫譜的方法包括以下步驟：

將所述黑蒜提取物與氘代試劑混合，將所得混合液依次進行渦旋振蕩、超聲和離心，得到上清液；所述氘代試劑中加入四甲基硅烷作為內標物；

取所述上清液進行核磁共振檢測，得到所述核磁共振氫譜。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述氘代試劑為氘代甲醇或重水；所述黑蒜提取物與氘代試劑的用量比為0.1g:0.6～1.0mL。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述渦旋震蕩的時間為3～10min；所述超聲的時間為10～20min；所述離心的速度為10000～12000rpm，時間為10～20min。

10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述核磁共振檢測的條件為：5mm多核寬帶觀測探頭，觀測頻率為600.13MHz，采用標準ZG30脈沖序列采集；參數設置為：圖譜寬度SW為19.8ppm，圖譜的中心點O1P為6.175ppm，譜圖分辨率FIDRES為0.363Hz，掃描次數NS為16。