[發明專利]與p62的K264位點乙酰化相關的腫瘤標志物及其用途

有效

• 申請號: 202111478774.1
• 申請日: 2021-12-06
• 公開（公告）號: CN113917150B
• 公開（公告）日: 2023-03-07
• 發明（設計）人: 王海英;羅建沅;熊健楠;李美婷
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京中和立達知識產權代理有限公司 11756
• 代理人: 楊磊

1.p62的K264位點乙酰化在制備用于預測堿基切除修復效率、腫瘤修復作用的產品中的應用，其特征在于：所述p62的K264位點乙酰化受到p62的乙酰轉移酶hMOF和p62的去乙酰化酶SIRT7共同調控，所述p62的K264位點乙酰化參與調控堿基切除修復，所述產品用于堿基切除修復效率高、腫瘤修復作用強，從而易于出現抗腫瘤藥物耐藥的患者預測，其通過常規分子生物學方法對患者的樣品進行檢測，所述樣品來自腫瘤組織、血液、血漿、血清、尿液、糞便、痰液或腹水；

所述p62的乙酰轉移酶hMOF介導所述p62的K264位點乙酰化，所述p62的去乙酰化酶SIRT7介導所述p62的K264位點去乙酰化，所述常規分子生物學方法包括酶聯免疫吸附測定、免疫組織化學、免疫細胞化學、免疫共沉淀或免疫印跡。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述產品為試劑盒，所述試劑盒包含與p62的K264位點乙酰化相關的腫瘤標志物，以及說明書，所述說明書記載了腫瘤患者和健康人群樣品中所述腫瘤標志物水平參考數據集合。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的應用，其特征在于：用于對堿基切除修復效率高、腫瘤修復作用強，從而易于出現抗腫瘤藥物耐藥的患者進行預測的方法包括以下步驟：

（1）提供來源于待測患者的樣品，對樣品中的腫瘤標志物水平進行檢測，所述腫瘤標志物為p62的K264位點乙酰化水平；

（2）將步驟（1）測得的標志物水平與腫瘤患者和健康人群樣品的相應腫瘤標志物水平參考數據集合進行比較；以及

（3）如果待測患者的樣品中所述腫瘤標志物的水平處于腫瘤患者相應腫瘤標志物水平參考數據集合的范圍內，且待測患者的樣品中所述腫瘤標志物的水平顯著遠離健康人群樣品的相應腫瘤標志物水平參考數據集合的范圍，則將所述患者判定為屬于對堿基切除修復效率高、腫瘤修復作用強，從而易于出現抗腫瘤藥物耐藥的患者；

在步驟（3）中，在堿基切除修復效率高、腫瘤修復作用強，從而易于出現抗腫瘤藥物耐藥的患者中，所述p62的K264位點乙酰化水平顯著高于健康人群樣品p62的K264位點乙酰化水平參考數據集合。

4.一種用于檢測p62的K264位點乙酰化的特異性抗體的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括以下步驟：

（1）人工合成IDVEHGGKRSRLTP序列p62-K264多肽，并將K位點進行乙酰化處理，所述K位點的乙酰化處理使用的乙酰化酶為hMOF；

（2）利用步驟（1）合成的多肽免疫兔獲得多克隆抗血清，酶聯免疫吸附試驗法測定血清中抗體效價，并對抗體進行純化處理，即得到所述特異性抗體。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：

在步驟（2）中，酶聯免疫吸附試驗法測定血清中抗體效價采用間接酶聯免疫吸附試驗法，對抗體進行純化處理使用的抗原親和柱為CnBr-activated Sepharose 4B。

6.一種用于檢測p62的K264位點乙酰化的特異性抗體，其特征在于：所述抗體由權利要求4或權利要求5所述的制備方法制備得到，所述抗體針對p62-K264多肽檢測靈敏度為3.3ng/ml。

7.權利要求6所述的特異性抗體在制備用于檢測p62的K264位點乙酰化的試劑中的用途，其特征在于：所述試劑用于權利要求1至3中任一項所述的p62的K264位點乙酰化的體內或體外檢測。