[發明專利]荷丹片液質聯用測定方法

在審

• 申請號: 202111469916.8
• 申請日: 2021-12-03
• 公開（公告）號: CN114113403A
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 曾英姿;周萬輝;趙磊
• 申請（專利權）人: 南昌濟順制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為;李旭

本發明涉及一種荷丹片液質聯用測定方法，所述方法包括將補骨脂苷、異補骨脂苷、金絲桃苷、槲皮素3?O?葡萄糖醛酸苷、異槲皮苷、番瀉苷B、紫云英苷、番瀉苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷葉堿、丹酚酸A、補骨脂素、異補骨脂素、丹酚酸C、大黃酸、新補骨脂異黃酮、補骨脂寧、隱丹參酮、補骨脂酚作為對照品，配制成對照品溶液A、B與供試品溶液，注入液質聯用儀中，其中A在正離子模式，B負離子模式在得到質譜圖，根據質譜圖計算供試品中有效成分的含量，色譜條件：Agilent C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)，流速0.4mL·min?1，進樣體積2μL。柱溫30℃，流動相0.2％磷酸水溶液(A)?乙腈(B)作為流動相，進行梯度洗脫。

技術領域

本發明涉及一種中成藥的檢測方法，特別涉及荷丹片液質聯用測定方法。

背景技術

荷丹片是一種已經上市的中成藥，由荷葉、丹參、山楂、番瀉葉、補骨脂(鹽炒) 組成。具有化痰降濁，活血化瘀的功效。用于痰濁、瘀血所致的高脂血癥。中國專利201910890137.1公開了一種荷丹片的質量檢測方法，該方法沒有公開有效成份的含量測定方法。中國專利2019108930497公開了一種高效液相色譜法測定荷丹片中多種有效成分的含量測定方法，但其中番瀉苷B、番瀉苷A、丹酚酸C三種成分無法檢測到。番瀉苷B、番瀉苷A、丹酚酸C分別是荷丹片中番瀉葉和丹參的主要活性成分，其含量是否穩定影響荷丹片的質量控制與藥效。本研究建立的方法樣品處理簡單，用醇溶液提取稀釋后即可直接測定，且三重四極桿質譜質譜MRM特異性強，定性定量的準確性大大優于紫外檢測器，可檢測出番瀉苷B、番瀉苷A、丹酚酸C的含量。

發明內容

本發明公開了一種新的荷丹片檢測方法，本發明方法采用液質聯用法，所述測定方法，包括以下步驟：

1)對照品溶液的配制：

將補骨脂苷、異補骨脂苷、金絲桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、異槲皮苷、番瀉苷B、紫云英苷、番瀉苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷葉堿、丹酚酸A、補骨脂素、異補骨脂素、丹酚酸C、大黃酸、新補骨脂異黃酮、補骨脂寧、隱丹參酮、補骨脂酚作為對照品，配制成對照品溶液；

2)供試品溶液的配制：

將荷丹片粉碎后用溶劑將有效成份溶出；

3)測定：

將對照品溶液和供試品溶液注入注入液質聯用儀中，得到色譜圖；

4)，根據色譜圖計算供試品溶液中補骨脂苷、異補骨脂苷、金絲桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、異槲皮苷、番瀉苷B、紫云英苷、番瀉苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷葉堿、丹酚酸A、補骨脂素、異補骨脂素、丹酚酸C、大黃酸、新補骨脂異黃酮、補骨脂寧、隱丹參酮、補骨脂酚的含量。

其中，所述色譜條件如下：液相色譜條件Agilent C18色譜柱(4.6mm×250mm， 5μm)，流速0.4mL·min-1，進樣體積2μL。柱溫30℃，流動相0.2％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)作為流動相，進行梯度洗脫，梯度洗脫過程如下：

質譜條件：電噴霧離子源(ESI)，正、負離子模式下分別掃描。正離子模式干燥氣溫度350℃，毛細管電壓35V，噴霧電壓3.4kV，干燥氣流速：10L/min，干燥氣壓力：35psi；負離子模式干燥氣溫度400℃，毛細管電壓-35V，噴霧電壓-3.4kV，干燥氣流速：10L/min，干燥氣壓力：35psi；檢測方式：多反應監測(MRM)。

其中，步驟1)所述對照品溶液的配制包括以下步驟：