[發(fā)明專利]基于RT-RAA熒光方法檢測(cè)乙型腦炎病毒的試劑和試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111462069.2
• 申請(qǐng)日: 2021-12-02
• 公開（公告）號(hào): CN114045362B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐志文;周遠(yuǎn)成;朱玲;聶民財(cái);魯令華;鄺山
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué);畜科生物工程有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.檢測(cè)乙型腦炎病毒的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括檢測(cè)乙型腦炎病毒的組合物；所述乙型腦炎病毒為乙型腦炎病毒JEV-SC-1毒株；所述組合物包括引物JEV-RAA-F2、JEV-RAA-R1和探針；所述引物JEV-RAA-F2的核苷酸序列如序列表中序列2所示；所述JEV-RAA-R1的核苷酸序列如序列表中序列3所示；所述探針的核苷酸序列如序列表中序列4所示；所述序列4的5’端起第31位核苷酸T上標(biāo)記熒光基團(tuán)6-羧基熒光素，所述序列4的距5’端33位核苷酸T標(biāo)記熒光淬滅基團(tuán)BHQ1，所述序列4的第31位核苷酸T和32位核苷酸G中間用四氫呋喃dSpacer修飾，所述序列4的3’末端核苷酸用C3-spacer修飾；所述序列4中的Y為C或T。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還含有RT熒光基礎(chǔ)反應(yīng)單元；所述RT熒光基礎(chǔ)反應(yīng)單元包含單鏈DNA結(jié)合蛋白、重組酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和/或DNA聚合酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還含有鎂離子緩沖液。

4.檢測(cè)乙型腦炎病毒的系統(tǒng)，其特征在于：所述系統(tǒng)含有權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的試劑盒和熒光檢測(cè)儀器。

5.權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述試劑盒中的所述檢測(cè)乙型腦炎病毒的組合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于：所述組合物的各組分為液體和/或固體粉末。

7.權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的試劑盒和/或權(quán)利要求5或6所述的組合物在非疾病診斷和/或治療的目的的乙型腦炎病毒檢測(cè)或輔助檢測(cè)中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述檢測(cè)或輔助檢測(cè)的RT-RAA反應(yīng)條件為39℃恒溫反應(yīng)30min。

9.權(quán)利要求4所述系統(tǒng)在制備乙型腦炎病毒檢測(cè)或輔助檢測(cè)產(chǎn)品中的應(yīng)用。