[發(fā)明專利]納米熒光標(biāo)記微球、PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針以及PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111456399.0
• 申請日: 2021-12-01
• 公開（公告）號: CN116254103A
• 公開（公告）日: 2023-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張國華;顧曉丹;黃玉瑩
• 申請（專利權(quán)）人: 上海凱創(chuàng)生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/06;G01N33/533;G01N33/573;G01N33/577;G01N33/58
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 安盼盼

本申請涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體公開了一種納米熒光標(biāo)記微球、PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針以及PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒。納米熒光標(biāo)記微球為由羧基修飾的銪鋱配合物，所述納米熒光標(biāo)記微球的直徑為0.2μm；PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針由PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體負載在上述納米熒光標(biāo)記微球而得；PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒包括包被有上述PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針的PGⅠ/PGⅡ檢測試劑卡。本申請的納米熒光標(biāo)記微球具有較高的熒光強度和較強的熒光壽命，且與抗體的交聯(lián)物具有較高的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，有利于提高PGⅠ/PGⅡ結(jié)合的穩(wěn)定性，有效提高了PGⅠ/PGⅡ檢測產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體地說，它涉及一種納米熒光標(biāo)記微球、PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針以及PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒。

背景技術(shù)

胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前體，根據(jù)其生化性質(zhì)和免疫原性將其分成2個亞群，分別為由胃底腺的主細胞和黏液頸細胞分泌的胃蛋白酶原Ⅰ，以及除由胃底腺的主細胞和黏液頸細胞分泌外，也可由賁門腺、胃竇的幽門腺的黏液頸細胞和十二指腸上段產(chǎn)生的胃蛋白酶原Ⅱ。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形態(tài)和功能。其中，PGⅠ是檢測胃泌酸腺細胞功能的指針，胃酸分泌增多PGⅠ升高，分泌減少或胃粘膜腺體萎縮PGⅠ降低；PGⅡ與胃底粘膜病變的相關(guān)性較大，其升高與胃底腺管萎縮、胃上皮化生或假幽門腺化生、異型增值有關(guān)；PGⅠ/PGⅡ比值和PGⅠ水平對于診斷慢性萎縮性胃炎、糜爛性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍等疾病有很高的價值。

目前，胃蛋白酶原的檢測方法較多，有酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法、時間分辨熒光免疫分析法、乳膠增強免疫比濁法等。在很長一段時間內(nèi)，針對PGⅠ/PGⅡ檢測產(chǎn)品或方法的研究以提高檢測靈敏度為主，如公開號為CN110596393A，公開日為2019年12月20日的中國發(fā)明專利公開了一種胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ的聯(lián)合檢測方法，其檢測胃蛋白酶Ⅰ抗原的靈敏度為0.5ng/mL，線性范圍為0～500ng/mL，相關(guān)系數(shù)R²為0.991；檢測胃蛋白酶Ⅱ抗原的靈敏度為0.5ng/mL，線性范圍為0～500ng/mL，相關(guān)系數(shù)R²為0.9881。再如公開號為CN107132359A，公開日為2017年9月5日的中國發(fā)明專利公開了一種胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ檢測方法及其試劑盒，其檢測胃蛋白酶Ⅰ抗原的靈敏度為0.5ng/mL，線性范圍為0～500ng/mL，相關(guān)系數(shù)R²為0.9994；檢測胃蛋白酶Ⅱ抗原的靈敏度為0.5ng/mL，線性范圍為0～500ng/mL，相關(guān)系數(shù)R²為0.9983。

隨著研究的不斷深入，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)僅以提高靈敏度為研究方向已不能很好滿足發(fā)展的需要，如何在保證較高靈敏度的前提下，提高PGⅠ/PGⅡ檢測產(chǎn)品的穩(wěn)定性，或者說重復(fù)性，是目前亟待解決的另一大問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了在保證較高靈敏度的前提下，提高PGⅠ/PGⅡ檢測產(chǎn)品的穩(wěn)定性，有效降低PGⅠ/PGⅡ檢測產(chǎn)品檢測的變異系數(shù)，本申請?zhí)峁┮环N納米熒光標(biāo)記微球、PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針以及PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒。

近年來，由于稀土元素離子具有特別的電子層結(jié)構(gòu)和豐富的能級數(shù)量，使它成為了一個巨大的發(fā)光材料寶庫，其價值和應(yīng)用日益受到廣泛的關(guān)注。稀土配合物發(fā)光材料具有發(fā)光譜帶窄、色純度高、Stokes位移大、熒光壽命長、物理和化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)良特性，使得稀土配合物在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其是作為藥物載體得以廣泛應(yīng)用。基于此，發(fā)明人在經(jīng)過大量的分析、試驗之后，研究出了一種具有較好穩(wěn)定性的納米熒光標(biāo)記微球，并在此基礎(chǔ)上制備出了可應(yīng)用于檢測待測樣液PGⅠ/PGⅡ水平的PGⅠ/PGⅡ單克隆抗體探針以及PGⅠ/PGⅡ檢測試劑盒。