[發明專利]疫苗質控方法、疫苗質控試劑及其應用

在審

• 申請號: 202111453163.1
• 申請日: 2021-12-01
• 公開（公告）號: CN114324889A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 張敬仁;王娟娟;安浩然;丁銘
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;C12Q1/06;A61K49/00;A61K39/09;A61K39/02;A61P31/04
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙麗婷

本發明涉及一種疫苗質控方法、疫苗質控試劑及其應用。疫苗質控方法包括：將待測疫苗進行檢測和確定檢測結果，其中，檢測包含抗體效價檢測、血液中病原菌清除半衰期檢測、肝臟中病原菌的捕獲率、肝竇細胞中對病原菌捕獲數量的檢測和動物存活率，當上述各個檢測方式的初步檢測結果均為待測疫苗質量達標，是待測疫苗最終質量達標的指示。本發明的質控方法，可于宿主機體?器官?細胞層面上追蹤和量化疫苗的免疫保護效果，其可實時定量、快速精準、全面地對疫苗的保護水平進行評價，具有準確性高的優點。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及疫苗質控方法、疫苗質控試劑及其應用，更具體涉及一種通過評估血流感染實驗動物模型中肝臟截留病原菌的效率快速精準評價疫苗保護水平的應用。

背景技術

預防性疫苗接種是上個世紀最重要的十大影響公共健康的成就之一，已經在世界范圍內有效控制了多種傳染性疾病的傳播，顯著降低了感染后的死亡率。根據世界衛生組織的統計數據，5歲以下兒童的全球死亡率從1990年的93例/1000人降低到2018年的39例，這與全球范圍內的兒童疫苗接種的推廣密不可分。作為控制傳染性疾病的有效策略，預防性疫苗接種使人類在1980年完全擺脫世紀難題天花的困擾，白喉、破傷風、百日咳、乙型肝炎、小兒麻痹等疾病也得到了有效地預防和控制，每年可以拯救兩到三百萬人的生命。

疫苗是預防和控制傳染性疾病的最有效的方式。疫苗免疫保護效果的準確評價是新型疫苗研發與推廣使用過程中的一個關鍵環節。但是，目前的疫苗評價指標無法精準反映疫苗產生免疫保護的具體過程與免疫效果差異的深層機制。因此，亟需開發一種快速精準評價疫苗保護水平的方法。

發明內容

本發明旨在至少在一定程度上解決現有技術中存在的技術問題至少之一。為此，本發明提供了一種疫苗質控方法、疫苗質控試劑及其應用，本發明的方法能夠實時定量、快速精準評價疫苗保護水平。

需要說明的是，本發明是基于發明人的下列工作而完成的：

疫苗是預防和控制傳染性疾病的最有效方式。疫苗免疫保護效果的準確評價是新型疫苗研發與推廣使用過程中的一個關鍵環節，目前評價疫苗保護效果的方法主要依賴：1)體外抗體效價與體外中性粒細胞調理吞噬殺菌(HL60殺菌實驗)；2)動物感染保護實驗。盡管這些評判手段為肺炎鏈球菌疫苗研發起到了重要的推動作用，但是都存在嚴重的缺陷。其中，抗體效價檢測只反映疫苗接種產生的總抗體水平，無法針對具有實際保護作用的抗體亞群。而HL60殺菌是以人源中性粒細胞系HL60為基礎的抗體功能性檢測方法，該方法可以反映血清中能夠幫助中性粒細胞吞噬殺菌的抗體，其缺陷是：1)HL60細胞系誘導分化周期長，2)敏感性低，3)不能反映中性粒細胞以外的其他免疫細胞的作用；并且體外HL60殺菌實驗無顯著效果的抗體能夠有效提升動物感染后存活率的報道屢見不鮮，這說明該方法并不能真實反映疫苗的保護效力。另外動物感染保護能夠展示疫苗保護水平，但是無法揭示產生免疫保護優劣的原因(機制)。因此，目前的疫苗評價指標無法精準反映疫苗產生免疫保護的具體過程與免疫效果差異的深層機制。

基于此，發明人對疫苗質控方法進行了深入研究，發明人通過以革蘭氏陽性人類致病菌肺炎鏈球菌和革蘭氏陰性人類致病菌肺炎克雷伯菌全菌滅活苗以及肺炎鏈球菌多糖結合疫苗為研究對象，首次發現了疫苗誘導的免疫保護殺菌過程主要在肝臟中完成；因此，發明人基于上述發現，建立了一種精準評價疫苗保護水平的疫苗質控方法，該方法可于宿主機體-器官-細胞層面上，追蹤和量化疫苗的免疫保護效果，從而能夠實時定量、快速精準地對疫苗的保護水平進行評價。