[發(fā)明專利]一種利用KASP分子標(biāo)記鑒定茄子顯性單性結(jié)實基因的引物對及其應(yīng)用

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• 申請日: 2021-11-30
• 公開（公告）號: CN113943731A
• 公開（公告）日: 2022-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉富中;舒金帥;張映;李淑培;陳鈺輝;楊錦坤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/686
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 王艷齋

本發(fā)明提供了一種利用KASP分子標(biāo)記鑒定茄子顯性單性結(jié)實基因的引物對及其應(yīng)用，所述引物對包括2條正向特異性引物和1條反向通用引物；所述正向特異性引物帶有FAM接頭或HEX接頭；帶有FAM接頭的正向特異性引物的序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；帶有HEX接頭的正向特異性引物的序列包括SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；所述反向通用引物的序列包括SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。本發(fā)明還提供了一種與茄子顯性單性結(jié)實基因連鎖的KASP分子標(biāo)記、一種鑒定茄子顯性單性結(jié)實基因的試劑盒以及一種鑒定茄子顯性單性結(jié)實基因的方法，可用于具有單性結(jié)實性狀的茄子品系的選育中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用KASP分子標(biāo)記鑒定茄子顯性單性結(jié)實基因的引物對及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

茄子(Solanum melongena L.)是世界范圍內(nèi)重要的蔬菜作物。近年來，隨著設(shè)施種植面積的不斷增加，茄子已成為我國北方設(shè)施栽培的主要蔬菜之一。

單性結(jié)實(Parthenocarpy)是指胚珠不經(jīng)過受精作用直接發(fā)育形成無籽果實的現(xiàn)象，由于其不需要經(jīng)過授粉、受精作用就可以形成果實，在很大程度上能夠抵御不良外界條件的影響，尤其是對低溫環(huán)境具有很好的適應(yīng)性。此外，單性結(jié)實的果實具有無籽特性，提高了果實的品質(zhì)，且不易褐變，延長了貨架期，具有諸多優(yōu)點。因此，選育和利用單性結(jié)實材料在新品種培育和生產(chǎn)實踐上具有非常重要的意義。

茄子是喜溫作物，花期遇低溫容易落花落果，從而造成產(chǎn)量降低(劉富中等，“溫度和蕾期去雄及去柱頭處理對茄子單性結(jié)實性的影響”，園藝學(xué)報，第6期，2005年)，而單性結(jié)實的茄子品種能夠極大地降低外界環(huán)境條件對授粉效率和坐果性的影響，顯著提高低溫弱光環(huán)境下茄子的坐果率和產(chǎn)量；同時單性結(jié)實品種茄子中無種子，且不易褐變，顯著提高了果實的商品性和品質(zhì)。因此，開發(fā)和利用茄子單性結(jié)實資源材料和相關(guān)基因，開展優(yōu)異資源材料創(chuàng)制和新品種選育，對滿足消費者對茄子品質(zhì)需求具有重要意義。

然而，我國茄子優(yōu)良單性結(jié)實種質(zhì)資源匱乏，尤其是適宜早春和越冬栽培的耐低溫弱光品種的種質(zhì)資源極其匱乏，成為制約我國茄子產(chǎn)業(yè)發(fā)展的技術(shù)瓶頸和短板。因此，挖掘和創(chuàng)制耐低溫弱光的茄子優(yōu)異資源，對解決耐低溫育種材料匱乏的短板具有重要意義。

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所茄子遺傳育種課題組對耐寒性強(qiáng)的圓茄單性結(jié)實株經(jīng)嚴(yán)格自交和定向選擇，育成顯性單性結(jié)實自交系D-10(n＞10代)，其在低溫條件下能夠正常開花結(jié)實，形成無籽果實，溫度正常時可以恢復(fù)結(jié)實特性，產(chǎn)生有籽果實(劉富中等，“溫度和蕾期去雄及去柱頭處理對茄子單性結(jié)實性的影響”，園藝學(xué)報，第6期，2005年；劉富中等，“茄子單性結(jié)實基因的遺傳分析及AFLP分子標(biāo)記”，園藝學(xué)報，第9期，2008年)。經(jīng)過多年研究，該單性結(jié)實資源已成功用于茄子雜交新品種選育中。為擴(kuò)大D-10顯性單性結(jié)實基因的應(yīng)用范圍，解決國內(nèi)茄子單性結(jié)實和耐低溫資源匱乏、利用率低等問題，該課題組已利用優(yōu)良的茄子自交系作為回交父本，以D-10為原始單性結(jié)實基因來源，通過多代回交和定向選育，育成多個顯性單性結(jié)實自交系，利用這些單性結(jié)實自交系配制的雜交種耐低溫性強(qiáng)、坐果率高、果實商品性好，克服了非單性結(jié)實品種在低溫弱光等環(huán)境下存在的諸多問題。但單性結(jié)實系在回交轉(zhuǎn)育過程中必須在低溫開花期進(jìn)行人工去雄，在坐果期進(jìn)行單性結(jié)實單株的選擇，耗時耗力，育種效率低。

篩選出與茄子單性結(jié)實基因緊密連鎖的分子標(biāo)記將有助于單性結(jié)實種質(zhì)的創(chuàng)制，提高育種效率。因此，在茄子中開發(fā)出與顯性單性結(jié)實基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，對提高優(yōu)良茄子顯性單性結(jié)實系的選育速度和育種效率具有重要的意義。因此，如何獲得一種與茄子顯性單性結(jié)實基因連鎖的分子標(biāo)記，幫助構(gòu)建耐低溫的優(yōu)良茄子單性結(jié)實系，已成為目前亟待解決的生產(chǎn)問題。

發(fā)明內(nèi)容