[發明專利]一種分子印跡復合二維材料高通量識別黃曲霉毒素的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202111427274.5
• 申請日: 2021-11-29
• 公開（公告）號: CN113893833A
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發明（設計）人: 佘永新;郝鋮;王靜;王淼;李騰飛
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/28;B01D15/08;B01J20/30;C08F220/06;C08F222/14;C08J9/28
• 代理公司: 成都宏田知識產權代理事務所(普通合伙) 51337
• 代理人: 菅秀君

本發明公開了一種分子印跡復合二維材料高通量識別黃曲霉毒素的制備方法，在室溫條件下將虛擬模板和功能單體、聚乙二醇/二硫化鉬復合材料，按照質量比1:4:1添加溶解到制孔劑中，避光預聚合12h，預聚合后加入交聯劑，超聲10min；向所述預聚合后的體系中按照質量比為20~50：0.01~0.05加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和2,2?偶氮二異丁腈并處于惰性氣體中于60℃水浴震蕩聚合24h后室溫鈍化2h得到聚合物，本發明通過MoS2功能化納米復合物為固相載體，利用表面印跡法合成高特異性分子印跡納米膜，實現了對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2同時吸附的分子印跡膜材料，能對黃曲霉毒素進行選擇性識別，因此具有了更好的包結絡合能力和化學穩定性。

技術領域

本發明涉及分子印跡聚合物領域，尤其涉及到一種分子印跡復合二維材料高通量識別黃曲霉毒素的制備方法。

背景技術

黃曲霉毒素（Aflatoxins)是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產物，特曲霉也能產生黃曲霉毒素，但產量較少。產生的黃曲霉毒素主要有AFB1，AFB2，AFG1，AFG2以及另外兩種代謝產物AFM1，AFM2。黃曲霉毒素一般會在田間和儲藏過程中污染農產品，如谷物、堅果、花生、水果、油籽和干果等。黃曲霉毒素被世界衛生組織（WHO)的癌癥研究機構劃定為Ⅰ類致癌物，是一種毒性極強的毒素。黃曲霉毒素的主要危害性在于它對人以及動物的肝臟組織有破壞作用，嚴重時，可導致肝癌甚至死亡。由于黃曲霉毒素污染的范圍主要在土壤，動植物，各種堅果，谷物，奶，食用油等及其制品，這就致使檢測的樣品基質復雜程度極高，并且，由于黃曲霉毒素的檢出限極低，樣品的前處理具有更高的靈敏度和選擇性就顯得尤為重要。黃曲霉毒素的前處理方法一般有：固-液萃取、液-液萃取、固相萃取（SPE）、固相微萃取（SPME）、分子印跡聚合物（MIPs）和免疫親和柱（ICA）等。

分子印跡聚合物（MIPs）是天然生物抗體-抗原系統的合成類似物。，具有選擇性地結合在吸附選擇過程中的模板分子。MIPs具有生物受體的特異性和選擇性，在環境條件下具有耐久性和低成本的顯著優勢。例如，天然受體通常需要在人體溫度范圍內的溫度下儲存和應用，而基于聚合物宿主的MIPs通常可以近乎無限期地儲存，因為通常不需要特殊的環境儲存條件，并且可以在更寬的溫度范圍內應用。但所有方法都遵循相同的基本輪廓：（1）生產含有共價或非共價結合到宿主官能團的模板或目標分子的聚合物，（2）將模板分子從聚合物主體中移除，留下可用于重新結合的靶向特定空腔，并且（3）MIP暴露于包含目標的樣品中，并且該空腔選擇性地從復雜樣品中上浮目標分子。合成受體的另一個優點是接近普遍性，特別是對于小分子。MIPs幾乎可以用于任何靶分子，這與生物系統形成鮮明對比，在生物系統中，靶分子必須與可用的抗體相匹配，或者必須為該靶分子專門產生抗體。此外，抗體更容易產生大分子而不是更小的分子靶。成本有時是一個附加因素；與天然抗體成本相比，MIPs通常來說成本更加低廉。

然而大部分都是以黃曲霉毒素為模板分子，利用本體聚合、沉淀聚合等傳統的合成方法制備特異性識別黃曲霉毒素的分子印跡聚合物，這些聚合物普遍存在著模板分子成本高、毒性大、吸附能力弱、通量低，很難同時檢測黃曲霉毒素B1等多種黃曲霉毒素類，因此需要一種分子印跡復合二維材料高通量識別黃曲霉毒素的制備方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種提高前處理效率，吸附量高的分子印跡復合二維材料高通量識別黃曲霉毒素的制備方法及其應用，可以直接選擇性吸附黃曲霉毒素B1、B2、G1、G達到快速簡便的分離。

本發明包括如下步驟：

A在室溫條件下將虛擬模板和功能單體、聚乙二醇/二硫化鉬復合材料，按照質量比1:4:1添加溶解到制孔劑中，避光預聚合12h，預聚合后加入交聯劑，超聲10min，所述虛擬模板為5,7-二甲氧基香豆素，所述二維材料二硫化鉬為固載基底,所述甲基丙烯酸為功能單體；

B向所述預聚合后的體系中按照質量比為20~50：0.01~0.05加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和2,2-偶氮二異丁腈并處于惰性氣體中于60℃水浴震蕩聚合24h后室溫鈍化2h得到聚合物；