[發明專利]一種含有胞外多糖的提取物、胞外多糖及組合物在審
| 申請號: | 202111424249.1 | 申請日: | 2021-11-26 |
| 公開(公告)號: | CN114163542A | 公開(公告)日: | 2022-03-11 |
| 發明(設計)人: | 耿麗麗;王美玲;張杰;束長龍;王澤宇 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;C12P19/02;C12P19/00;A01N43/16;A01N63/50;A01N63/23;A01P7/04;C12R1/07 |
| 代理公司: | 北京聿華聯合知識產權代理有限公司 11611 | 代理人: | 賈艷華 |
| 地址: | 100194 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 含有 多糖 提取物 組合 | ||
1.一種含有胞外多糖的提取物,其通過如下步驟提取得到:
1)將蘇云金芽胞桿菌的發酵液pH值調至8至9,然后進行第一離心,收集第一離心后的第一上清液;
2)在所述第一上清液中加入三氯乙酸或三氯乙酸的水溶液,從而用三氯乙酸處理所述第一上清液,得到第一處理液,然后進行第二離心,收集第二離心后的第二上清液;
3)將所述第二上清液的pH值調至6至7后向所述第二上清液中加入乙醇,得到第二處理液,對所述第二處理液進行沉淀,然后進行第三離心,收集第三離心后的沉淀物,所述沉淀物即為濕的含有胞外多糖的提取物;優選地,將所述沉淀物進行冷凍干燥,從而得到干的含有胞外多糖的提取物。
2.根據權利要求1所述的提取物,其特征在于,所述蘇云金芽胞桿菌為4D19菌株。
3.根據權利要求1所述的提取物,其特征在于,在步驟2)中,所述三氯乙酸與第一上清液中的質量/體積含量為0.4%至0.5%;和/或
在步驟3)中,向所述第二上清液中加入的乙醇的體積為所述第二上清液的體積的3至3.5倍。
4.根據權利要求1所述的提取物,其特征在于,在步驟2)中,所述第一處理液于25至35℃下放置1.5至3個小時;和/或
在步驟3)中,所述第二處理液于2至8℃放置12至20小時。
5.根據權利要求1所述的提取物,其特征在于,所述第一離心、所述第二離心、所述第三離心的離心速度獨立地為6000至8000r/min,離心溫度獨立地為3至10℃,離心時間獨立地為30至40min。
6.根據權利要求1所述的提取物,其特征在于,培養所述蘇云金芽胞桿菌的培養基為LB培養基、以葡萄糖為底物的產糖培養基和以蔗糖為底物的產糖培養基中的一種。
7.一種胞外多糖,其由權利要求1至6中任意一項所述的提取物經殘留蛋白去除、脫鹽、陰離子交換層析和凝膠過濾層析純化得到;
優選地,所述胞外多糖為EPS-1和/或EPS-2,其中,
以所述EPS-1的總質量計作100%,所述EPS-1中的總糖含量為93.95%,糖醛酸的含量為3.73%,還原糖的含量為1.8%;
所述EPS-1的Mw=155.6kDa,Mn=154.0kDa,Mz=157.2kDa,所述EPS-1的分散度為1.01;
以所述EPS-2的總質量計作100%,所述EPS-2中的總糖含量為96.53%,糖醛酸的含量為0.94%,還原糖的含量為1.48%;
所述EPS-2的Mw=58.0kDa,Mn=56.8kDa,Mz=59.3kDa,所述EPS-2的分散度為1.02;
所述EPS-2由甘露糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和甘露糖醛酸組成,其中,以所述EPS-2的總質量計作100%,所述EPS-2中的甘露糖的含量為44.2%,氨基葡萄糖的含量為35.5%,氨基半乳糖的含量為8.0%,葡萄糖的含量為5.5%,阿拉伯糖的含量為5.1%。
8.一種組合物,其包括如權利要求1至6中任意一項所述的提取物或如權利要求7中所述的胞外多糖,以及來源于蘇云金芽胞桿菌的殺蟲晶體蛋白和/或源于蘇云金芽胞桿菌的營養期殺蟲蛋白;
優選地,所述組合物還包括農藥學上可接受的助劑;
優選地,所述組合物形成的劑型為懸浮劑、可濕性粉劑和顆粒劑中的一種。
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