[發(fā)明專利]誘導(dǎo)蝴蝶蘭種子產(chǎn)生多倍體并提高萌發(fā)率的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111409102.5
• 申請日: 2021-11-25
• 公開（公告）號: CN114568304A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 賈瑞冬;吳婷;葛紅;楊樹華;趙鑫;寇亞平;李秋香
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/08;A01H6/62
• 代理公司: 北京威禾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11838
• 代理人: 王月玲

1.一種誘導(dǎo)蝴蝶蘭種子產(chǎn)生多倍體并提高種子萌發(fā)率的方法，包括以下步驟：

(a)收集蝴蝶蘭種子并分裝到茶葉袋中；

(b)將所述種子滅菌；

(c)在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)滅菌后的所述種子，持續(xù)第一時間段，其中所述第一時間段為0-10d；

(d)向所述液體培養(yǎng)基中添加秋水仙素，使所述秋水仙素的濃度為0.05％-0.2％，處理第二時間段，其中所述第二時間段為1-5d；以及

(e)將步驟(d)所得種子播種至第一固體培養(yǎng)基，任選地，60d后統(tǒng)計其萌發(fā)率。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(c)中，所述液體培養(yǎng)基為：1/2MS+20g.L^-1蔗糖+100g.L^-1椰汁。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(e)中，所述第一固體培養(yǎng)基為：1/2MS+20g.L^-1蔗糖+100g.L^-1椰汁+5.0g.L^-1瓊脂。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(a)包括：采集蝴蝶蘭果莢，用無菌水清洗，然后將不同果莢的種子混勻放入經(jīng)滅菌的茶葉袋中。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(b)包括：用無菌水清洗所述種子，再用75％酒精滅菌30s，之后用無菌水清洗，再用0.1％升汞滅菌10min，最后用清水清洗。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(e)包括：將經(jīng)過步驟(d)處理的種子晾干，然后播種到所述第一固體培養(yǎng)基中。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述第一時間段為0-5d，優(yōu)選5d；和/或其中步驟(d)中，所述第二時間段為1-3d，優(yōu)選1d。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，其中步驟(d)中，所述秋水仙素的濃度為0.1％-0.2％，優(yōu)選0.2％。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述蝴蝶蘭是象鼻蘭。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的方法，還包括步驟(f)：在種子萌發(fā)后，將其轉(zhuǎn)接至第二固體培養(yǎng)基，所述第二固體培養(yǎng)基為：1/2MS+1.0mg.L^-16-BA+0.2mg.L^-1NAA+5.0g.L^-1瓊脂+20g.L^-1蔗糖。