[發明專利]利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法

在審

• 申請號: 202111364506.7
• 申請日: 2021-11-17
• 公開（公告）號: CN113999931A
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 劉中良;高俊杰
• 申請（專利權）人: 泰安市農業科學研究院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6806;A01H1/04;A01H6/20
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 張國棟

本發明屬于分子標記育種技術領域，公開了一種利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法，包括：選擇心葉為白色的大白菜作為母本，選擇心葉為桔紅色或黃色的大白菜作為父本，將父本與母本進行雜交獲得F1代心葉為白色的大白菜；利用F1代大白菜進行自交，得到F2代心葉為白色的大白菜；通過回交，分子標記篩選、回交，在得到的大白菜群體中篩選出心葉為桔紅色或黃色的大白菜，并依次自交、回交一次，得到心葉為桔紅色或黃色的大白菜自交系。本發明為心葉為桔紅色或黃色的自交系大白菜快速選育提供新的育種工具，解決了心葉為桔紅色或黃色的自交系大白菜的快速育種需求。

技術領域

本發明屬于分子標記育種技術領域，尤其涉及一種利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法。

背景技術

目前，花色是植物適應環境的表型性狀之一，是蟲媒植物引誘昆蟲進行授粉的一個重要視覺信號，對植物生存繁衍具有重要意義。同時花色可以影響蚜蟲取食，生產中選育不同花色的作物品種具有降低蚜蟲傳病的作用，可以維持花瓣的能量平衡，避免花器官受傷害。在生產實踐中花色可用于鑒別真假雜交種。

大白菜是我國栽培面積和產量最大的蔬菜作物之一，具有重要的經濟價值。不同花色的大白菜其心葉顏色也不相同，更重要的是不同顏色的大白菜其營養價值以及口感、產量都不相同，而現有技術還沒有利用與白菜顏色有關的分子標記進行育種的技術；同時現有的黃色心葉與桔紅色心葉的白菜并無可以延續相應優良形狀的純合自交系。

通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：現有技術還沒有利用與白菜顏色有關的分子標記進行育種的技術；同時現有的黃色心葉與桔紅色心葉的白菜并無可以延續相應優良形狀的純合自交系。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法。

本發明是這樣實現的，一種利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法，所述利用與大白菜花色相關的分子標記進行輔助育種的方法包括：

步驟一，進行大白菜心葉顏色分子標記的篩選；選擇心葉為白色的大白菜作為母本，選擇心葉為桔紅色或黃色的大白菜作為父本，將父本與母本進行雜交獲得F1代心葉為白色的大白菜；

步驟二，利用得到的F1代心葉為白色的大白菜進行自交，得到F2代心葉為白色的大白菜；

步驟三，以得到的F2代心葉為白色的大白菜為母本，以初始心葉為白色的大白菜為父本進行回交，得到F3代心葉為白色的回交大白菜；

步驟四，對得到的得到F3代心葉為白色的回交大白菜，利用預先篩選得到的分子標記進行輔助選擇心葉為桔紅色或黃色目的性狀基因轉移的個體，獲得F4代心葉為白色的大白菜；

步驟五，利用F4代心葉為白色的的大白菜進行自交，得到F5代心葉為白色的大白菜；

步驟六，重復步驟四至步驟五兩次，在得到的大白菜群體中篩選出心葉為桔紅色或黃色的大白菜，并依次自交、回交一次，得到心葉為桔紅色或黃色的大白菜自交系。

進一步，所述進行大白菜心葉顏色分子標記的篩選包括：

取白色心葉純合自交系大白菜、黃色心葉純合自交系以及桔紅色心葉純合自交系進行雜交，得到雜交大白菜，雜交后培育獲得重組自交系；

分別提取白色心葉純合自交系大白菜、黃色心葉純合自交系以及桔紅色心葉純合自交系親本基因組DNA，利用SSR引物進行PCR擴增，篩選多態性SSR引物；

利用多態性SSR引物構建大白菜遺傳連鎖圖譜；利用描述統計對群體數據實施正態性檢驗，對不契合正態分布的表現型數據進行標準化處理，對心葉花色突變位點進行QTL定位分析，確定與大白菜心葉花色連鎖的分子標記。

進一步，所述提取基因組DNA包括：