[發明專利]一種反相色譜固定相及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202111362572.0
• 申請日: 2021-11-17
• 公開（公告）號: CN114029037B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;俞冬萍;韓紫薇;郭志謀;金高娃;周永正;霍麗多
• 申請（專利權）人: 贛江中藥創新中心
• 主分類號: B01J20/22
• 分類號: B01J20/22;B01J20/10;B01J20/30;B01D15/32
• 代理公司: 南昌賢達專利代理事務所(普通合伙) 36136
• 代理人: 張雪娟

本發明公開了一種反相色譜固定相及其制備方法和應用，涉及液相色譜固定相技術領域，反相色譜固定相的結構式為：其中Silica?Gel為硅膠，n＝0～10。所述反相色譜固定相的制備方法，通過巰基?烯烴點擊反應將截短側耳素修飾到硅膠表面，制備得到新型反相色譜固定相。所述反相色譜固定相的能夠應用于分離非極性化合物等物質。本發明提供的反相色譜固定相的結構新穎，制備方法簡單高效，固定相中含水疏水骨架，同時多種官能團如酯基、羰基、羥基和硫醚鍵可提供不同的分離選擇性，可廣泛用于各類化合物的分離分析。

技術領域

本發明涉及液相色譜固定相技術領域，具體說是一種使用二萜化合物截短側耳素在硅膠表面進行修飾的反相色譜固定相及其制備方法和應用。

背景技術

反相色譜是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質的極性差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。反相色譜具有柱效高、分離能力強、保留機理清楚等優點，是液相色譜分離模式中使用最為廣泛的一種，廣泛應用于生物大分子、蛋白質及酶等樣品的分離分析。

反相固定相中最具代表性的是以硅膠為載體，通過表面鍵合非極性分子層制備，獲得性能穩定的反相填料。在硅膠基質的反相填料中，常規的C8、C18、苯基、五氟苯基鍵合基團最為常見。Matysova等報道了利用苯己基固定相對驅蟲劑中雙羥萘酸噻嘧啶、奧芬達唑、芬苯達唑、丁基羥基茴香醚具有良好的分離效果。但是目前常用種類的固定相并不能滿足所有樣品的分離需求，因此需要開發新型結構的反相固定相來提升不同樣品之間分離選擇性。

發明內容

本發明的目的在于至少解決現有技術中存在的技術問題之一，提供一種反相色譜固定相及其制備方法，該鍵合相含有二萜化合物截短側耳素結構，其制備方法簡單，適用性廣泛。

本發明的技術解決方案如下：

本發明第一方面提供了一種反相色譜固定相，其結構式如下：

其中Silica?Gel為硅膠，n＝0～10。

本發明第二方面一種反相色譜固定相的制備方法，包括以下步驟：

a、硅膠預處理：硅膠加入濃度為20～40wt％的強酸溶液中，加熱回流攪拌1～48小時，過濾，用水洗滌至pH＝6～7，所得固體于干燥箱中100～160℃條件下干燥8～24小時，得酸化后硅膠；

b、巰基中間體合成：在氮氣或氬氣保護下，在有機溶劑中加入巰基硅烷偶聯劑和酸化后硅膠，在20～130℃下反應1～48小時，過濾，依次用甲醇、四氫呋喃、甲醇進行洗滌，所得固體于干燥箱中40～80℃條件下真空干燥8～24小時，得到巰基中間體；

c、巰基-烯烴點擊反應：在氮氣或氬氣保護下，在有機溶劑/水混合溶液中加入截短側耳素、自由基引發劑和巰基中間體，在40～80℃下反應8～48小時，過濾，依次用水、甲醇、水、甲醇洗滌，所得固體于干燥箱中40～80℃條件下真空干燥8～24小時，得到色譜固定相。

本發明的一種具體實施方式，步驟a所用的強酸溶液為鹽酸、硝酸、硫酸中的一種；以每克硅膠計，強酸溶液的用量為2～20mL。

本發明的一種具體實施方式，步驟b所用的巰基硅烷偶聯劑有如下結構：

其中，X為氯、甲氧基或乙氧基中的一種，n＝0～10；

以每克硅膠計，巰基硅烷偶聯劑的用量為1～10mmol。

本發明的一種具體實施方式，步驟b所用的有機溶劑為二氯甲烷、甲苯、二甲苯、二甲亞砜、N,N～二甲基甲酰胺中的一種；以每克硅膠計，有機溶劑的用量為5～15mL。

本發明的一種具體實施方式，步驟c所用的有機溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、二甲亞砜、N,N～二甲基甲酰胺中的一種。