[發(fā)明專利]篩選提高惡唑霉素類化合物產(chǎn)量的共培養(yǎng)體系的方法及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111356220.4
• 申請日: 2021-11-16
• 公開（公告）號: CN116135967A
• 公開（公告）日: 2023-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚華榮;劉翔;張集慧;孫慧瑩;李金娥
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/54;C12N15/76;C12N15/65;C07D491/107;C12R1/19;C12R1/465
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 喬獻(xiàn)麗;張瑩

本發(fā)明提供篩選提高惡唑霉素類化合物產(chǎn)量的共培養(yǎng)體系的方法及所獲得的共培養(yǎng)體系、通過該體系獲得的惡唑霉素類化合物。本發(fā)明能夠高通量篩選微生物之間的相互作用，快速獲得目的基因簇增強(qiáng)表達(dá)的培養(yǎng)體系，為鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物的挖掘提供一種有效的方法；所述共培養(yǎng)體系可以方便快捷地實(shí)現(xiàn)龍勝鏈霉菌CGMCC?4.1101中惡唑霉素類化合物產(chǎn)量的提高，為結(jié)構(gòu)新穎惡唑霉素類化合物的分離和鑒定提供基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體來說，涉及通過微生物共培養(yǎng)偶聯(lián)報(bào)告系統(tǒng)高通量篩選的方法發(fā)現(xiàn)能促進(jìn)龍勝鏈霉菌CGMCC?4.1101中惡唑霉素類化合物產(chǎn)量提高的鏈霉菌-枯草芽孢桿菌共培養(yǎng)體系，及其在所獲得的結(jié)構(gòu)新穎惡唑霉素類化合物制備中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

鏈霉菌作為一種絲狀細(xì)菌，不僅具有復(fù)雜的發(fā)育分化過程，還能產(chǎn)生豐富的次級代謝產(chǎn)物，如具有治療寄生蟲病活性的阿維菌素(Campbell?WC.History?of?avermectinand?ivermectin,with?notes?on?the?history?of?other?macrocyclic?lactoneantiparasitic?agents[J].Current?Pharmaceutical?Biotechnology,2012,13:853-865)、具有抗癌活性的鹽霉素(Naujokat?C,Steinhart?R.Salinomycin?as?a?drug?fortargeting?human?cancer?stem?cells[J].Journal?of?Biomedicine?andBiotechnology,2012,2012:950658)、具有新型冠狀病毒蛋白酶抑制活性的亮肽素(Fu?L,Shao?S,Feng?Y,et?al.Mechanism?of?microbial?metabolite?leupeptin?in?thetreatment?of?COVID-19?by?traditional?Chinese?medicine?herbs[J].Mbio,2021:e0222021)以及具有抑菌或抗癌等多種活性的惡唑霉素(Oleksak?P,Gonda?J,NepovimovaE,et?al.The?oxazolomycin?family:a?review?of?current?knowledge[J].RSCAdvances,2020,10:40745-40794)等，是活性天然產(chǎn)物最重要的來源之一(Selim?MSM,Abdelhamid?SA,Mohamed?SS.Secondary?metabolites?and?biodiversity?ofactinomycetes[J].Journal,Genetic?EngineeringBiotechnology,2021,19:72)。同時(shí)，鏈霉菌中豐富的次級代謝過程又受到復(fù)雜而嚴(yán)格的分子調(diào)控(Liu?G,Chater?KF,ChandraG,et?al.Molecular?regulation?of?antibiotic?biosynthesis?in?Streptomyces[J].Microbiology?and?Molecular?Biology?Reviews,2013,77:112-143)，自然條件下，鏈霉菌抗生素的產(chǎn)生具有一定的時(shí)空依賴性，產(chǎn)量往往維持在相對較低水平，因此需要通過多種方式提高其產(chǎn)量，才能進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用(Parekh?S,Vinci?VA,StrobelRJ.Improvement?of?microbial?strains?and?fermentation?processes[J].AppliedMicrobiology?and?Biotechnology,2000,54:287-301)。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明人基于革蘭氏陰性菌的酰基高絲氨酸內(nèi)酯(acyl-homoserine?lactone，簡稱AHL)信號分子群感效應(yīng)構(gòu)建了適用于鏈霉菌的可視化基因表達(dá)報(bào)告系統(tǒng)—VRS-bAHL(visualization?reporter?system?based?on?acyl-homoserine?lactone)，其特征為利用革蘭氏陰性菌的AHL信號分子合酶基因cviI作為報(bào)告基因，利用AHL指示菌對報(bào)告基因的表達(dá)情況進(jìn)行檢測，具有背景干凈、靈敏度高、易操作、適用范圍廣及可進(jìn)行可視化高通量篩選等特點(diǎn)。