[發明專利]一種基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法

在審

• 申請號: 202111344860.3
• 申請日: 2021-11-12
• 公開（公告）號: CN114062570A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 歐祖蘭;焦春燕;王占軍;朱小茜;陳倩穎;徐忠東
• 申請（專利權）人: 合肥師范學院
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

1.一種基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將待測樣品殺青烘烤至恒重，并研磨過篩，收集粉末，所述待測樣品為半夏塊莖或鷂落坪半夏塊莖；

(2)將步驟(1)所得粉末與乙醇溶液混合，進行熱回流提取，并進行減壓濃縮，得到有機酸粗提液；

(3)將步驟(2)中獲得的有機酸粗提液用無水碳酸鈉水溶液調節pH值至10～12，用乙酸乙酯反復萃取至萃取液無色，合并萃取液；

(4)將步驟(3)所得萃取液用鹽酸酸化至pH值2～3，再以乙酸乙酯反復萃取，合并萃取液；

(5)將步驟(4)所得萃取液減壓蒸干后，用乙醇溶液復溶，得到總游離有機酸待測樣品；

(6)用超高效液相色譜-串聯質譜檢測所述總游離有機酸待測樣品，并用標準物質數據庫和三重四級桿質譜的多反應檢測模式MRM，對總游離有機酸待測樣品的成分分別進行定性和定量分析；

(7)基于步驟(6)中定性和定量分析的結果，獲得總游離有機酸的具體成分及其在半夏和鷂落坪半夏中含量的差異。

2.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，殺青溫度為100℃～110℃，殺青時間為10～20min；烘烤溫度為50℃～60℃，烘烤時間為24～72h；樣品粉末過篩目數為50～70目。

3.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，粉末的質量與乙醇溶液的體積比為300～500mg：3～5mL；熱回流提取溫度為60℃～80℃，提取時間為1～2h，提取次數為2～3次；乙醇溶液濃度為70％～80％。

4.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，無水碳酸鈉水溶液濃度為3％～5％，乙酸乙酯萃取次數為3～5次；所述步驟(4)中，乙酸乙酯萃取次數為3～5次。

5.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(6)中色譜檢測條件：

色譜柱：Agilent SB-C18 1.8μm×2.1mm×100mm；

流動相：A相為體積濃度為0.1％的甲酸水溶液，B相為體積濃度為0.1％的甲酸乙腈溶液。

6.根據權利要求5所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于：

流動相流速：0.35mL/min；色譜柱的柱溫40℃；進樣量4μL；

洗脫梯度：0.00min B相比例為5％，9.00min內B相比例線性增加到95％，并維持在95％1min，10.00～11.10min，B相比例降為5％，并以5％平衡至14min。

7.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(6)中質譜檢測條件：

線性離子阱和三重四極桿掃描在三重四極桿線性離子阱質譜儀，AB4500 QTRAP UPLC/MS/MS系統上獲得的，該系統配備ESI Turbo離子噴霧接口，由Analyst 1.6.3軟件控制運行正負兩種離子模式。

8.根據權利要求7所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，電噴霧離子源操作參數為：離子源，渦輪噴霧；源溫度550℃；離子噴霧電壓5500V/-4500V；離子源氣體I，氣體II和簾氣分別設置為50、60和25psi，碰撞誘導電離參數設置為高。

9.根據權利要求7所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，在QQQ和LIT模式下分別用10μmol/L和100μmol/L聚丙二醇溶液進行儀器調諧和質量校準；QQQ掃描使用MRM模式，并將碰撞氣體氮氣設置為中等；通過優化去簇電壓和碰撞電壓，完成各個MRM離子對的DP和CE；根據每個時期內洗脫的代謝物，在每個時期監測一組特定的MRM離子對。

10.根據權利要求1所述的基于有機酸評價半夏和鷂落坪半夏品質的方法，其特征在于，所述步驟(6)中，標準物質數據庫具體為MWDB。