[發明專利]一種發酵培養基及發酵生產多殺菌素的方法

在審

• 申請號: 202111326345.2
• 申請日: 2021-11-10
• 公開（公告）號: CN114015604A
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 祁桂玲;程曦;王學偉;范令濤;楊柳
• 申請（專利權）人: 河北興柏農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12P19/62;C12R1/01
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 郜彥茹

本發明涉及一種發酵培養基及發酵生產多殺菌素的方法，包括發酵基礎培養基，發酵補料培養基一和二；發酵基礎培養基包括：葡萄糖7.5?8％，棉籽粉2.5?3％，酵母膏0.5?1％，玉米漿0.5?1％，蛋白胨0.5?1％，磷酸二氫鉀0.2?0.4％，碳酸鈣0.2?0.3％，硫酸銨0.5?1％，硫酸錳0.0002?0.0005％，鉬酸鈉0.0002?0.0005％，硫酸亞鐵0.0001?0.0002％，大豆油0.5?1％，消沫劑0.015?0.03％；補料培養基一包括：玉米漿30％、磷酸二氫鉀2％、氯化鈉2％；補料培養基二包括：葡萄糖65％，磷酸二氫鉀0.5％。本發明顯著提高了刺糖多胞菌的多殺菌素產素水平。

技術領域

本發明屬于發酵技術領域，具體涉及一種發酵培養基及發酵生產多殺菌素的方法。

背景技術

多殺菌素是刺糖多胞菌有氧發酵的胞內次級代謝產物，屬于大環內酯類抗生素，其因高效低殘留對哺乳動物、鳥類、魚類甚至大多數益蟲具有寬廣的安全界限等優點，而多次獲得美國“總統綠色化學品挑戰獎”。

然而，目前多殺菌素的發酵生產所存在的問題是，傳統的發酵方式下，刺糖多胞菌的產素水平低，刺糖多胞菌的生產潛力不能得到有效發揮。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中的的缺陷，提供了一種發酵培養基及發酵生產多殺菌素的方法。

為實現上述目的，本發明所采取的技術方案如下：

技術方案一：

一種多殺菌素發酵培養基，包括發酵基礎培養基，發酵補料培養基一，發酵補料培養基二；

所述發酵基礎培養基中，包括以下原料：葡萄糖7.5-8％，棉籽粉2.5-3％，酵母膏0.5-1％，玉米漿0.5-1％，蛋白胨0.5-1％，磷酸二氫鉀0.2-0.4％，碳酸鈣0.2-0.3％，硫酸銨0.5-1％，硫酸錳0.0002-0.005％，鉬酸鈉0.0002-0.0005％，硫酸亞鐵0.0001-0.0002，大豆油0.5-1％，消沫劑0.015-0.03％；水余量，PH調至7.2-7.4；

所述發酵補料培養基一中，包括以下原料：玉米漿30％、磷酸二氫鉀2％、氯化鈉2％，水余量；

所述發酵補料培養基二中，包括以下原料：葡萄糖65％，磷酸二氫鉀0.5％，水余量。

進一步的，所述發酵基礎培養基的滅菌方法為：121-123℃溫度滅菌30min；

所述發酵補料培養基一的滅菌方法為：121-123℃溫度滅菌30min；

所述發酵補料培養基二的滅菌方法為：115-120℃溫度滅菌20-25min。

技術方案二：

一種發酵生產多殺菌素的方法，包括如下步驟：

首先將滅菌后的發酵基礎培養基調節pH為7.0-7.3；然后將種子培養液按10％-15％的接種量接種于發酵基礎培養基中，發酵培養250-320h，即可。

進一步的，發酵培養時，發酵溫度為28-30℃。

進一步的，發酵培養時，發酵液溶氧水平為：菌體處于遲滯期和對數生長期時，控制發酵液溶氧水平大于等于50％；

菌體進入生產期后，控制發酵液溶氧水平35-50％。

進一步的，發酵培養時，當菌體進入生產期后，通過補入pH調節劑的方式控制發酵液pH為6.0-7.0。

進一步的，發酵培養中，當發酵時間達到85-90h和185-190h時，分別補入發酵補料培養基一；所述發酵補料培養基一的補料體積為運行體積的1.5-2.0％。