[發明專利]一種直接測定谷丙甘氨酸膠囊中3種氨基酸含量的方法

在審

• 申請號: 202111322692.8
• 申請日: 2021-11-09
• 公開（公告）號: CN114047265A
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發明（設計）人: 任琦;陳希;肖小武;洪燕;姚閩;章紅;石青松
• 申請（專利權）人: 江西省藥品檢驗檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

1.一種直接測定谷丙甘氨酸膠囊中3種氨基酸含量的方法，所述方法，包括以下步驟：

1)對照品溶液的制備：稱取L-谷氨酸對照品、L-丙氨酸對照品和甘氨酸對照品，置同一量瓶中，加溶液A使溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為對照品儲備溶液；再經流動相稀釋，得到對照品溶液；

2)供試品溶液的制備：取谷丙甘氨酸膠囊內容物，置量瓶中，加溶液A使溶解，再用乙腈稀釋至刻度；得到供試品溶液；

3)測定：將對照品溶液和供試品溶液注入高效液相色譜儀，得到色譜圖，根據色譜圖計算供試品溶液中谷氨酸，丙氨酸和甘氨酸的含量；

其中，所述高效液相色譜儀的色譜條件如下：

色譜柱為：Sharpsil氨基柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流動相：溶液A∶乙腈＝43-47∶53-57

其中，溶液A為18-22mmol/L磷酸二氫鉀溶液，配制方法如下：取磷酸二氫鉀2-3g，加水1L溶解后，加濃氨4-6mL，用磷酸調節pH值至4.5-5.5

流速：0.8-1.2mL/min；

柱溫：35-45℃；

進樣量：10-100μL；

檢測波長：200-220nm。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色譜儀的色譜條件如下：色譜柱為：Sharpsil氨基柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流動相：溶液A∶乙腈＝45∶55

其中，溶液A為20mmol/L磷酸二氫鉀溶液，配制方法如下：取磷酸二氫鉀2.72g，加水1L溶解后，加濃氨5mL，用磷酸調節pH值至5.0

流速：1.0mL/min；

柱溫：40℃；

進樣量：50μL；

檢測波長：210nm；

3.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對照品溶液的制備，方法如下：精密稱取L-谷氨酸對照品90-110mg、L-丙氨酸對照品35-45mg和甘氨酸對照品15-22mg，置同一50mL量瓶中，加溶液A20-30mL，超聲2-10min使溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為對照品儲備溶液；再精密量取上述溶液4-6mL，置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻作為對照品溶液。

4.根據權利要求3所述的方法，其中，所述對照品溶液的制備，方法如下：精密稱取L-谷氨酸對照品102.08mg、L-丙氨酸對照品39.08mg和甘氨酸對照品17.68mg，置同一50mL量瓶中，加溶液A25mL，超聲5min使溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為對照品儲備溶液；再精密量取上述溶液5mL，置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻作為對照品溶液。

5.根據權利要求1所述的方法，其中，所述供試品溶液的制備，方法如下：取谷丙甘氨酸膠囊內容物混勻，稱取70-80mg，置50mL量瓶中，加溶液A20-30mL，超聲2-10min使溶解，再用乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

6.根據權利要求5所述的方法，其中，所述供試品溶液的制備，方法如下：取谷丙甘氨酸膠囊內容物混勻，稱取77mg，置50mL量瓶中，加溶液A25mL，超聲5min使溶解，再用乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

7.根據權利要求4所述的方法，其中，所述對照品儲備溶液含谷氨酸2mg/mL、丙氨酸0.75mg/mL和甘氨酸0.34mg/mL。

8.根據權利要求4述的方法，其中，所述對照品溶液含谷氨酸1mg/mL、丙氨酸0.38mg/mL和甘氨酸0.17mg/mL。

9.根據權利要求4述的方法，其中，所述供試品溶液含谷氨酸1mg/mL、丙氨酸0.38mg/mL和甘氨酸0.17mg/mL。