[發明專利]甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法、偶聯磁珠及試劑盒

在審

• 申請號: 202111320937.3
• 申請日: 2021-11-09
• 公開（公告）號: CN114034865A
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 楊美玲;梁曉丹;劉雄浪;閆承夫;夏皓男
• 申請（專利權）人: 石家莊斯巴克生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/68;G01N33/576;G01N33/543;G01N33/531
• 代理公司: 鄭州匯誠眾遠專利代理事務所(普通合伙) 41211
• 代理人: 栗星

1.一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：在甲胎蛋白抗體中加入預處理液進行預處理，之后將經過預處理的甲胎蛋白抗體與羧基磁珠偶聯，得到甲胎蛋白抗體偶聯磁珠，其中預處理液包括十二烷基硫酸鈉溶液。

2.根據權利要求1所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：十二烷基硫酸鈉溶液的濃度為0.2～0.3％，預處理時間為5～10min，預處理溫度為20～25℃。

3.根據權利要求2所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：十二烷基硫酸鈉溶液的濃度為0.2％、預處理時間為10min，預處理溫度為25℃。

4.根據權利要求1所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：所述預處理液還包括濃度為10mM～80mM的MES緩沖液。

5.根據權利要求1所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：羧基磁珠在于甲胎蛋白抗體偶聯前，與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與N-羥基琥珀酰亞胺的混合液進行混合活化，其中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與N-羥基琥珀酰亞胺的濃度均為8～12mg/ml；活化溫度為23～28℃，活化時間為10～20min。

6.根據權利要求5所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：將經過活化的羧基磁珠在MES緩沖液中洗滌2～3次，其中MES緩沖液的濃度為10mM～80mM，pH為5.5～7.5，之后將經過預處理的甲胎蛋白抗體和經過洗滌的羧基磁珠進行混合偶聯的溫度為22～28℃，混合偶聯時間為1～5h。

7.根據權利要求6所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：將經過偶聯的磁珠放入含有0.1％BSA的MES緩沖液中封閉處理，其中密封時間為5～8h，密封溫度為22～28℃，之后將經過密封處理的偶聯磁珠加入到Tris緩沖液重懸保存，保存溫度為2～8℃。

8.根據權利要求1所述的一種甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法，其特征在于：所述甲胎蛋白抗體包被每毫克羧基磁珠的量為10～30μg。

9.一種偶聯磁珠，其特征在于：通過權利要求1-8任一項所述的甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法制得的偶聯磁珠。

10.一種試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括權利要求1-8任一項所述的甲胎蛋白抗體包被磁珠的方法制得的甲胎蛋白抗體偶聯磁珠。