[發(fā)明專利]一種敵百蟲半抗原及其制備方法、抗原、抗體及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111299579.2
• 申請(qǐng)日: 2021-11-04
• 公開（公告）號(hào): CN113896743A
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊星星;周佳;付輝;李澍才;李道霞;姚歡;余曉琴;王炳志;馬濤;楊國偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市易瑞生物技術(shù)股份有限公司;四川省食品檢驗(yàn)研究院
• 主分類號(hào): C07F9/40
• 分類號(hào): C07F9/40;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/548;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/58
• 代理公司: 北京匯知杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11587
• 代理人: 楊巍;柴春玲

1.一種敵百蟲半抗原，其特征在于，所述敵百蟲半抗原的結(jié)構(gòu)式如式(I)所示：

其中，所述R₁選自C₀-C₆亞烷基；所述R₂選自C₁-C₆亞烷基；

優(yōu)選地，所述敵百蟲半抗原具有如式(I-1)所示的結(jié)構(gòu)：

2.一種用于制備權(quán)利要求1所述的敵百蟲半抗原的中間體，其結(jié)構(gòu)式如式(II)所示：

其中，所述R₁選自C₀-C₆亞烷基；

優(yōu)選地，所述中間體具有如式(II-1)所示的結(jié)構(gòu)：

3.一種制備權(quán)利要求1所述的敵百蟲半抗原的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟1：在低溫下，使三氯化磷與結(jié)構(gòu)式為的化合物1反應(yīng)，經(jīng)減壓蒸餾后得到中間體1：

其中，R₁選自C₀-C₆亞烷基；

優(yōu)選地，三氯化磷和化合物1的摩爾比為1:(1-1.1)；

步驟2：在低溫下，使所述中間體1在堿性條件下與無水甲醇和吡啶反應(yīng)，得到中間體2：

優(yōu)選地，所述中間體1、無水甲醇和吡啶的摩爾比為1:1:(2-5)；

步驟3：在縛酸劑條件下，使所述中間體2與三氯乙醛反應(yīng)，得到中間體3：

優(yōu)選地，所述中間體2、三氯乙醛和縛酸劑的摩爾比為1:(1-1.2):(1-3)；

優(yōu)選地，所述縛酸劑選自有機(jī)堿，所述有機(jī)堿選自三乙胺、二乙胺、N,N-二異丙基乙胺、4-二甲氨基吡啶、1,8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯、四甲基乙二胺和吡啶中的至少一種；

步驟4：使所述中間體3與結(jié)構(gòu)式為的化合物2在引發(fā)劑的存在下進(jìn)行反應(yīng)，得到式(I)所示的敵百蟲半抗原：

其中，R₂選自C₁-C₆亞烷基；

優(yōu)選地，所述中間體3、化合物2和引發(fā)劑的摩爾比為1:(1-2):(0.1-0.3)；

優(yōu)選地，所述引發(fā)劑為安息香雙甲醚、和/或偶氮二異丁腈。

4.一種敵百蟲抗原，所述敵百蟲免疫抗原包含：權(quán)利要求1所述的敵百蟲半抗原、以及與所述敵百蟲半抗原偶聯(lián)的載體蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的敵百蟲抗原，其特征在于，所述載體蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、雞卵清白蛋白或血藍(lán)蛋白。

6.一種敵百蟲抗體，其特征在于，所述敵百蟲抗體為特異性針對(duì)權(quán)利要求4或5所述的敵百蟲抗原的抗體；

優(yōu)選地，所述敵百蟲抗體為敵百蟲單克隆抗體或敵百蟲多克隆抗體。

7.權(quán)利要求1所述的敵百蟲半抗原、權(quán)利要求4或5所述的敵百蟲抗原、權(quán)利要求6所述的敵百蟲抗體在敵百蟲免疫學(xué)檢測中的應(yīng)用。

8.一種敵百蟲膠體金層析檢測裝置，其特征在于，所述敵百蟲膠體金層析檢測裝置包括試紙條和反應(yīng)杯，其中，所述試紙條包括反應(yīng)膜，所述反應(yīng)膜上有檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線包被有權(quán)利要求4或5所述的敵百蟲抗原，所述反應(yīng)杯中含有膠體金標(biāo)記的權(quán)利要求6所述的敵百蟲抗體。

9.一種檢測樣品中敵百蟲的方法，所述方法包括：使權(quán)利要求8所述的膠體金層析檢測裝置與樣品接觸。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，所述的樣品為蔬菜、水果、可食動(dòng)物組織、水或土壤。