[發明專利]一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝

在審

• 申請號: 202111279256.7
• 申請日: 2021-11-01
• 公開（公告）號: CN113861304A
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 李秋;黃小麗;劉聰敏;冷翔鵬;繆炆均
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 石家莊隆康知識產權代理事務所(普通合伙) 13140
• 代理人: 陸瀅炎

本發明提供一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝，包括以下步驟：將新鮮采摘的鮮食葡萄通過清洗設備洗凈，瀝干水分得到處理樣品；在單因素試驗的基礎上，利用Box－Behnken Design(BBD)中心組合設計，以PPs提取得率Y(％)為響應值，考察三個獨立變量對提取得率的影響。本發明以鮮食葡萄為原料，采用超聲提取法對鮮食葡萄的多糖進行提取。在單因素實驗的基礎上，采用響應面法設計對鮮食葡萄多糖的超聲提取條件進行優化，以確定鮮食葡萄多糖的最佳提取工藝條件。

技術領域

本發明屬于鮮食葡萄提取技術領域，具體涉及一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝。

背景技術

鮮食葡萄為葡萄科葡萄屬木質藤本植物，小枝圓柱形，有縱棱紋，無毛或被稀疏柔毛，葉卵圓形，圓錐花序密集或疏散，基部分枝發達。葡萄是世界最古老的果樹樹種之一，葡萄的植物化石發現于第三紀地層中，說明當時已遍布于歐、亞及格陵蘭。葡萄原產亞洲西部，世界各地均有栽培，世界各地的葡萄約95%集中分布在北半球。葡萄為著名水果，生食或制葡萄干，并釀酒，釀酒后的酒腳可提酒石酸，根和藤藥用能止嘔。

目前，提取植物多糖的方法有熱水浸提法、酸堿溶液提取法、微波提取法、超聲提取法等多種方法，其中超聲提取法操作簡單，并且可以在較低溫度、較短時間下獲得較高的得率，已被開發運用在多種植物活性成分的提取中。超聲提取法需考察的影響因素較多，而設計結合響應面法可確定影響得率的關鍵因素，并對其進行優化。響應面實驗設計是一種回歸試驗設計方法，通過相關實驗采集數據，采取多元二次回歸方程進行擬合自變量(試驗因素)和響應值(試驗指標)之間的函數關系，建立相應的數學模型，對二次多項式回歸方程的計算分析來尋求最優工藝參數，是解決多變量問題的一種統計方法，其預測結果可信度高，能夠快速確定多因素系統的最佳實驗條件。基于此，本發明提供一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝。

發明內容

本發明的目的在于提供一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝，以解決上述背景技術中提出的問題。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案予以實現：

一種響應面法優化鮮食葡萄多糖超聲波輔助提取工藝，包括以下步驟：

步驟一：將鮮食葡萄經超聲細胞粉碎機處理，脫脂、脫蛋白、除去低聚糖和小分子雜質，最后揮干溶劑，得到處理樣品；

步驟二：通過處理樣品分別進行單因素考察，考察三個獨立變量，料液比、超聲時間和超聲功率，所述料液比、超聲時間和超聲功率分別用A、B和C表示；

步驟三：在單因素試驗的基礎上，利用Box－Behnken Design(BBD)中心組合設計，以鮮食葡萄多糖提取得率Y(％)為響應值，考察三個獨立變量對提取得率的影響；

步驟四：在對鮮食葡萄多糖得率的響應面實驗結果進行回歸分析，對三個因素進行回歸擬合后得到回歸方程：

提取率=

+13.47-2.35×A-0.083×B+0.84×C+0.24×A×B+0.15×A×C-

1.92×B×C-3.04×A²-4.42×B²-4.98×C²。

優選地，所述提取工藝中糖含量的測定方法為：精確稱取105℃干燥并恒重的葡萄糖標品0.01g，溶解于超純水，并定容至100m1，得0.1mg/m1溶液；精密吸取0、0 .2、0 .4、0.6、0 .8、1 .0ml至吸管中加超純水補至2ml，各加入5％苯酚溶液1m1，搖勻，垂直液面快速加入濃硫酸5ml，搖勻；冷水浴至溫度下降到室溫，顯色；以空白為對比，用紫外分光光度計測定490mm波長處的吸光度；以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程y=4.36x+0.0614(R²=0.9991)；x為葡萄糖標準品濃度，單位mg/ml，y為吸光度值；