[發明專利]一種大蒜病毒的多重PCR檢測試劑盒在審
| 申請號: | 202111255823.5 | 申請日: | 2021-10-27 |
| 公開(公告)號: | CN113981142A | 公開(公告)日: | 2022-01-28 |
| 發明(設計)人: | 趙永強;劉燦玉;張碧薇;葛潔;楊青青;楊峰;樊繼德;陸信娟;史新敏;李勇 | 申請(專利權)人: | 江蘇徐淮地區徐州農業科學研究所(江蘇徐州甘薯研究中心) |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司: | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人: | 牛芳 |
| 地址: | 22100*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 大蒜 病毒 多重 pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.一種大蒜病毒的多重PCR檢測試劑盒,其特征在于,包括SLV、GCLV、LYSV、OYDV和
所述大蒜病毒為蔥潛隱病毒SLV、大蒜普通潛隱病毒GCLV、韭蔥黃條病毒LYSV、洋蔥黃矮病毒OYDV和青蔥X病毒屬
2. 根據權利要求1所述多重PCR檢測試劑盒,其特征在于,SLV、GCLV、LYSV、OYDV、
3.根據權利要求1所述多重PCR檢測試劑盒,其特征在于,SLV、GCLV、LYSV、OYDV、
4.根據權利要求1所述多重PCR檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括陽性對照、陰性對照、緩沖液、PCR酶或水中的一種或幾種的組合。
5.根據權利要求1所述多重PCR檢測試劑盒,其特征在于,所述引物對預混為試劑P。
6.一種檢測大蒜中蔥潛隱病毒SLV、大蒜普通潛隱病毒GCLV、韭蔥黃條病毒LYSV、洋蔥黃矮病毒OYDV和青蔥X病毒屬病毒
(1)按照SEQ ID NO:1~10所示的核苷酸序列合成SLV、GCLV、LYSV、OYDV和
(2)提取待測樣品中的RNA并反轉錄獲得cDNA;
(3)以cDNA為模板,以步驟(1)中的引物對為引物進行PCR反應,獲得PCR產物;
(4)將PCR產物進行瓊脂糖凝膠電泳;
(5)根據電泳條帶進行判斷:出現592 bp條帶含有SLV,出現431 bp條帶含有GCLV,出現338 bp條帶含有LYSV,出現265 bp條帶含有OYDV,出現190 bp條帶含有
7. 根據權利要求6所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,SLV、GCLV、LYSV、OYDV和
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR反應的退火溫度為54.0-60.0℃。
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