[發(fā)明專利]一種蘭州百合種苗高效繁育方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111247128.4
• 申請(qǐng)日: 2021-10-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113841613B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李淑潔;林玉紅;裴懷弟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 蘭州錦知源專利代理事務(wù)所(普通合伙) 62204
• 代理人: 鐘國(guó)

本發(fā)明公開(kāi)了一種蘭州百合種苗高效繁育方法，是以蘭州百合實(shí)生種子為外植體，將實(shí)生種子經(jīng)過(guò)種子收集、脫菌、萌發(fā)、至少一次增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)及鱗莖膨大培養(yǎng)步驟，制備得到百合種苗。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明以種子萌發(fā)代替鱗片扦插生產(chǎn)種苗，阻斷了因鱗片扦插引起的病毒代際傳播和積累，與現(xiàn)有技術(shù)相比，顯著降低了百合種苗病毒載量，提高了種苗群體的異質(zhì)性，有效解決了蘭州百合種苗繁殖中因采用無(wú)性繁殖方式引起的病毒積累和遺傳背景狹窄等缺陷。本繁育方法可用于蘭州百合種質(zhì)資源保存和種苗的工廠化繁育，有利于蘭州百合新品種選育、優(yōu)良品種的快速推廣、種質(zhì)資源的保存和創(chuàng)新，以及提高蘭州百合的產(chǎn)量和品質(zhì)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及百合種苗種球繁育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蘭州百合種苗高效繁育方法。

背景技術(shù)

蘭州百合長(zhǎng)期以鱗片扦插、莖生小鱗莖的方式繁殖種球，存在因病毒積累和傳播嚴(yán)重引起的種性退化問(wèn)題，嚴(yán)重影響了蘭州百合的品質(zhì)和產(chǎn)量，制約了蘭州百合產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。據(jù)調(diào)查，雖然蘭州百合自然座果率平均只有7.15%，但蘭州百合蒴果內(nèi)種子數(shù)量大，每個(gè)蒴果內(nèi)含約200～250粒種子，且飽滿率為30～67.6%。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種蘭州百合種苗高效繁育方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種蘭州百合種苗高效繁育方法，所述繁育方法是以蘭州百合實(shí)生種子為外植體，將實(shí)生種子經(jīng)過(guò)種子收集、脫菌、萌發(fā)、至少一次增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)及鱗莖膨大培養(yǎng)步驟，即可得到百合種苗。

進(jìn)一步的，上述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，包括以下步驟：

1)實(shí)生種子收集：收集花后的蘭州百合蒴果，去除果皮，得到實(shí)生種子；

2)實(shí)生種子脫菌：將步驟1）得到的含有胚的實(shí)生種子洗凈后，分別以乙醇溶液和次氯酸鈉溶液浸泡，再以無(wú)菌水清洗，并以無(wú)菌濾紙吸干水分，即得到脫菌實(shí)生種子；

3)誘導(dǎo)胚萌發(fā)：將步驟2）得到的脫菌實(shí)生種子以植物激素浸泡后，以無(wú)菌蒸餾水清洗，再接種至萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即可得到胚萌發(fā)實(shí)生苗；

4)增殖培養(yǎng)：將步驟3）得到的胚萌發(fā)實(shí)生苗切根后分株接種至增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行種苗繁育培養(yǎng)，即可到的叢生苗；所述增殖培養(yǎng)過(guò)程至少進(jìn)行一次；

5)壯苗培養(yǎng)：將步驟4）得到的叢生苗分株接種至壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到試管苗；

6)鱗莖膨大培養(yǎng)：將步驟5）得到的試管苗接種到鱗莖膨大培養(yǎng)基上培養(yǎng)，即可得到百合種苗。

進(jìn)一步的，上述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，所述步驟1）中，所收集的蘭州百合蒴果為花后50天以上的蒴果。

進(jìn)一步的，上述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，所述步驟2）中，實(shí)生種子先以清水沖洗9-11min，洗凈后以體積百分比為70%濃度的乙醇溶液浸泡40-50s，再以質(zhì)量體積比為2%的次氯酸鈉溶液浸泡10-20min，最后以無(wú)菌水清洗3次，無(wú)菌濾紙吸干水分，即可到的脫菌實(shí)生種子。

進(jìn)一步的，上述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，所述步驟3）中，所用激素為100-500mg/L的赤霉素GA₃，浸泡時(shí)間為22-26h；無(wú)菌蒸餾水清洗3次，萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為24-26℃，培養(yǎng)時(shí)間為10-30 d；光照條件為先以暗培養(yǎng)方式，待胚萌發(fā)后再采用光周期為16h光/8h暗的方式進(jìn)行光照培養(yǎng)。

進(jìn)一步的，上述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，所述步驟4）中，增殖培養(yǎng)基組成為：MS培養(yǎng)基+6-BA 1.0-1.5mg/L+NAA 0.05-0.5mg/L+3%蔗糖+0.5%瓊脂，pH=5.8；增殖培養(yǎng)溫度為24-26℃，培養(yǎng)時(shí)間為30-60 d；光照條件：采用光周期為16-20h光/4-8h暗的方式；后續(xù)的增殖培養(yǎng)采用將第一次增殖培養(yǎng)得到的叢生苗接種至同樣的增殖培養(yǎng)基中再次進(jìn)行增殖培養(yǎng)。