[發明專利]一種蘭州百合種苗高效繁育方法

有效

• 申請號: 202111247128.4
• 申請日: 2021-10-26
• 公開（公告）號: CN113841613B
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發明（設計）人: 李淑潔;林玉紅;裴懷弟
• 申請（專利權）人: 甘肅省農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 蘭州錦知源專利代理事務所(普通合伙) 62204
• 代理人: 鐘國

1.一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述繁育方法是以蘭州百合實生種子為外植體，將實生種子經過種子收集、脫菌、萌發、至少一次增殖培養、壯苗培養及鱗莖膨大培養步驟，即可得到百合種苗，具體包括以下步驟：

1）實生種子收集：收集花后的蘭州百合蒴果，去除果皮，得到實生種子；

2）實生種子脫菌：將步驟1）得到的含有胚的實生種子洗凈后，分別以乙醇溶液和次氯酸鈉溶液浸泡，再以無菌水清洗，并以無菌濾紙吸干水分，即得到脫菌實生種子；

3）誘導胚萌發：將步驟2）得到的脫菌實生種子以植物激素浸泡后，以無菌蒸餾水清洗，再接種至萌發培養基中培養，即可得到胚萌發實生苗；

4）增殖培養：將步驟3）得到的胚萌發實生苗切根后分株接種至增殖培養基中進行種苗繁育培養，即可到叢生苗；所述增殖培養過程至少進行一次；

5）壯苗培養：將步驟4）得到的叢生苗分株接種至壯苗培養基中培養，得到試管苗；

6）鱗莖膨大培養：將步驟5）得到的試管苗接種到鱗莖膨大培養基上培養，即可得到百合種苗。

2.根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟1）中，所收集的蘭州百合蒴果為花后50天以上的蒴果。

3.根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟2）中，實生種子先以清水沖洗9-11min，洗凈后以體積百分比為70%濃度的乙醇溶液浸泡40-50s，再以質量體積比為2%的次氯酸鈉溶液浸泡10-20min，最后以無菌水清洗3次，無菌濾紙吸干水分，即可到的脫菌實生種子。

4. 根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟3）中，所用激素為100-500mg/L的赤霉素GA₃，浸泡時間為22-26h；無菌蒸餾水清洗3次，萌發培養基為1/2MS培養基，培養溫度為24-26℃，培養時間為10-30 d；光照條件為先以暗培養方式，待胚萌發后再采用光周期為16h光/8h暗的方式進行光照培養。

5. 根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟4）中，增殖培養基組成為：MS培養基+6-BA 1.0-1.5mg/L+NAA 0.05-0.5mg/L+3%蔗糖+0.5%瓊脂，pH=5.8；增殖培養溫度為24-26℃，培養時間為30-60 d；光照條件：采用光周期為16-20h光/4-8h暗的方式；后續的增殖培養采用將第一次增殖培養得到的叢生苗接種至同樣的增殖培養基中再次進行增殖培養。

6. 根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟5）中，壯苗培養基為1/2MS培養基，培養溫度為24-26℃，培養時間為30-50 d；采用光周期為16h光/8h暗的方式進行光照培養。

7.根據權利要求1所述的一種蘭州百合種苗高效繁育方法，其特征在于，所述步驟6）中，鱗莖膨大培養基組成為：MS培養基+活性炭0.5-1.5g/L+矮壯素0.25-0.5mg/L+蔗糖80g/L+瓊脂0.5%，pH=5.8，培養時間為85-95d，培養溫度為18-22℃，采用光周期為16-20h光/4-8h暗的光照條件進行。