[發(fā)明專(zhuān)利]中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111246876.0
• 申請(qǐng)日: 2021-10-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114252521A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭艷萍;刁和芳;貴書(shū)琪;趙開(kāi)軍;彭雲(yún);王海麗
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇弘典中藥產(chǎn)業(yè)研究院有限公司;南京中山制藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 陸志斌

1.一種中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、中藥半邊蓮供試品溶液的制備：

取不同批次的中藥半邊蓮，分別精密稱(chēng)取中藥半邊蓮樣品，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理，過(guò)濾，濾液蒸干，用甲醇復(fù)溶，過(guò)微孔濾膜，得供試品溶液；

步驟2、對(duì)照品溶液的制備：

精密稱(chēng)定槲皮苷、木樨草素、蒙花苷、芹菜素、香葉木素對(duì)照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成對(duì)照品溶液；

步驟3、精密吸取步驟2的對(duì)照品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖；

步驟4，分別精密吸取步驟1的各批次供試品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄樣品色譜圖；

步驟5，將步驟4中獲得的中藥半邊蓮供試品溶液的指紋圖譜導(dǎo)出，并導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A；選擇不同批次中藥半邊蓮供試品的色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰；用平均值計(jì)算法生成中藥半邊蓮的對(duì)照指紋圖譜，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積；并根據(jù)混合對(duì)照品溶液色譜圖的保留時(shí)間，標(biāo)注對(duì)照指紋圖譜中峰的化學(xué)成分。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟1中藥半邊蓮供試品溶液制備方法為：取11批次的中藥半邊蓮，精密稱(chēng)取中藥半邊蓮樣品1～5g置錐形瓶中，加甲醇50mL，超聲處理0.5～1h，過(guò)濾，濾液蒸干，用甲醇復(fù)溶，定容至5mL，過(guò)0.22μm微孔濾膜，得供試品溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2混合對(duì)照品溶液的制備：精密稱(chēng)定槲皮苷、木樨草素、芹菜素、香葉木素對(duì)照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為503.50μg/mL的槲皮苷、20.15μg/mL的木犀草素、10.0394μg/mL的芹菜素、25.46μg/mL香葉木素混合對(duì)照品溶液；精密稱(chēng)定蒙花苷，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為156.31μg/mL的蒙花苷對(duì)照品溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟3、步驟4中，液相色譜條件為：色譜柱：YMC-Pack ODS-A，流動(dòng)相：甲醇為A相，水為B相，紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)：330nm，柱溫40℃，流速1.0mL/min，進(jìn)樣體積：20μL，梯度洗脫程序如下：

程序	時(shí)間/min	甲醇濃度/％	水濃度/％
1	0.01	30	70
2	5.00	30	70
3	15.00	35	65
4	20.00	40	60
5	30.00	42.5	57.5
6	35.00	46	54
7	45.00	48	52
8	55.00	48	52
9	60.00	100	0

。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥半邊蓮指紋圖譜的檢測(cè)方法，其特征在于，指紋譜圖中共有峰11個(gè)；其中槲皮苷保留時(shí)間為27.905min，為4號(hào)峰；木樨草素的保留時(shí)間為42.060min，為6號(hào)峰；蒙花苷的保留時(shí)間為43.628min，為7號(hào)峰；芹菜苷的保留時(shí)間為51.790min，為9號(hào)峰；香葉木素的保留時(shí)間為54.699min，為11號(hào)峰。