[發明專利]特異性抑制PAK4基因表達的siRNA及其應用

在審

• 申請號: 202111242145.9
• 申請日: 2021-10-25
• 公開（公告）號: CN114196672A
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發明（設計）人: 黃淵余;梁興杰;陸梅
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61P35/00
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 黃志興

1.一種特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，所述siRNA含有完全反向互補的正義鏈和反義鏈，所述正義鏈和所述反義鏈的核苷酸序列分別為如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ IDNO.8或SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10中的任意一對所示。

2.根據權利要求1所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，所述正義鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反義鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根據權利要求1或2所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，所述正義鏈和/或所述反義鏈的至少一個核苷酸的核糖基上引入核糖修飾，所述正義鏈和/或所述反義鏈的磷酸-糖骨架中的磷酸酯基的至少一個為具有修飾基團的磷酸酯基。

4.根據權利要求3所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，所述核糖修飾為甲氧基修飾或氟代修飾，所述具有修飾基團的磷酸酯基為磷酸二酯鍵中的氧原子被硫原子取代而形成的硫代磷酸酯基。

5.根據權利要求4所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，按照5'末端到3'末端的方向，所述正義鏈的第5、7、8、9位的核苷酸為氟代修飾的核苷酸，所述正義鏈中其余位置的核苷酸為甲氧基修飾的核苷酸，所述反義鏈的第2、6、8、9、14、16位的核苷酸為氟代修飾的核苷酸，所述反義鏈中其余位置的核苷酸為甲氧基修飾的核苷酸；其中，所述氟代修飾的核苷酸為核糖基的2'-羥基被氟取代而形成的核苷酸，所述甲氧基修飾的核苷酸為核糖基的2'-羥基被甲氧基取代而形成的核苷酸。

6.根據權利要求3所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA，其特征在于，所述具有修飾基團的磷酸酯基存在于由以下位置所組成的組中的至少一處：

所述正義鏈的5'末端端部第1個核苷酸和第2個核苷酸之間；

所述正義鏈的5'末端端部第2個核苷酸和第3個核苷酸之間；

所述正義鏈的3'末端端部第1個核苷酸和第2個核苷酸之間；

所述正義鏈的3'末端端部第2個核苷酸和第3個核苷酸之間；

所述反義鏈的5'末端端部第1個核苷酸和第2個核苷酸之間；

所述反義鏈的5'末端端部第2個核苷酸和第3個核苷酸之間；

所述反義鏈的3'末端端部第1個核苷酸和第2個核苷酸之間；以及

所述反義鏈的3'末端端部第2個核苷酸和第3個核苷酸之間。

7.一種藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物含有根據權利要求1至6中任意一項所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA。

8.根據權利要求1至6中任意一項所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA和/或根據權利要求7所述的藥物組合物在制備用于抑制腫瘤細胞中PAK4基因表達的藥物中的應用；

優選地，所述腫瘤細胞為小鼠黑色素瘤細胞和/或小鼠結腸癌細胞。

9.根據權利要求1至6中任意一項所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA和/或根據權利要求7所述的藥物組合物在制備用于阻斷腫瘤細胞中Wnt/β-catenin信號通路的藥物中的應用；

優選地，所述腫瘤細胞為小鼠黑色素瘤細胞和/或小鼠結腸癌細胞。

10.根據權利要求1至6中任意一項所述的特異性抑制PAK4基因表達的siRNA和/或根據權利要求7所述的藥物組合物在制備用于促進腫瘤組織中免疫細胞浸潤的藥物中的應用；

優選地，所述腫瘤為小鼠黑色素瘤和/或小鼠結腸癌。