[發明專利]一種促進脂肪沉積的微生物菌劑及其分離方法與應用

在審

• 申請號: 202111222820.1
• 申請日: 2021-10-20
• 公開（公告）號: CN113980841A
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 尹杰;馬杰;夏嗣廷;譚軍;黃興國;李鐵軍;印遇龍
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01K67/02;C12R1/225
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 張國棟

1.一種促進脂肪沉積的微生物菌劑，其特征在于，所述促進脂肪沉積的微生物菌劑為寧鄉豬糞便分離的約氏乳桿菌，保藏號：CCTCC M 20211241。

2.如權利要求1所述的促進脂肪沉積的微生物菌劑，其特征在于，所述約氏乳桿菌使用劑量為1×10⁹CFU/ml。

3.一種如權利要求1所述的促進脂肪沉積的微生物菌劑在制備促進脂肪沉積組合物中的應用。

4.一種驗證如權利要求1所述的促進脂肪沉積的微生物菌劑藥效的動物模型構建方法，其特征在于，所述動物模型構建方法包括：

(1)選取體重相近，健康狀況相似的ICR雄鼠30只，分為3個組：對照組，高脂組和高脂+約氏乳桿菌灌胃組，每組10只小鼠；

(2)約氏乳桿菌灌胃組為每日上午9：00進行，灌胃量為0.3ml/只，菌液濃度為1×10^9CFU/ml；

(3)鼠房采用12h光照和12h黑暗循環的管理方法，溫度和濕度適宜，自由飲水和采食。

5.如權利要求4所述動物模型構建方法，其特征在于，步驟(1)中，所述ICR雄鼠的體重為36.5g。

6.一種如權利要求1所述的促進脂肪沉積的微生物菌劑所述的促進脂肪沉積的微生物菌劑的分離方法，其特征在于，所述促進脂肪沉積的微生物菌劑的分離方法包括：

取健康寧鄉豬糞便0.1g，用5mL無菌PBS溶解、振蕩混勻，梯度稀釋至10^-7，吸取100μL梯度在10^-2～10^-7的稀釋液涂布于添加0.5％L-半胱氨酸MRS平板中，置于5％二氧化碳、37℃恒溫培養箱培養48h；選擇稀釋梯度合適的平板，挑取不同形態的單菌落，并利用擴增細菌16S rDNA基因通用引物為27-FAGAGTTTGATCCTGGCTCAG和1492R-GGTTACCTTGTTACGACTT進行菌落PCR鑒定。