[發明專利]檢測蓋塔病毒的熒光RT-RAA引物、試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111191385.0
• 申請日: 2021-10-13
• 公開（公告）號: CN114015805A
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 徐志文;周遠成;朱玲;聶民財;鄺山
• 申請（專利權）人: 四川農業大學;畜科生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.基于熒光RT-RAA用于檢測蓋塔病毒的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括檢測蓋塔病毒的組合物；所述組合物包括引物RT-RAA-F2、RT-RAA-R2和探針；所述引物RT-RAA-F2的核苷酸序列如序列表中序列2所示；所述引物RT-RAA-R2的核苷酸序列如序列表中序列3所示；所述探針的核苷酸序列如序列表中序列4所示。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述探針具有下述任一修飾或其組合：

A1)在序列表中序列4第31核苷酸上標記熒光基團；

A2)在序列表中序列4的第32位核苷酸標記淬滅基團；

A3)在序列表中序列4的第31位堿基和32位堿基中間用四氫呋喃修飾；

A4)在序列表中序列4的第46位核苷酸用C3-spacer標記。

3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括RT熒光基礎反應單元；所述RT熒光基礎反應單元包含單鏈DNA結合蛋白、重組酶、逆轉錄酶和/或DNA聚合酶。

4.根據權利要求1或2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括鎂離子緩沖液。

5.權利要求1-4中任一權利要求所述的檢測蓋塔病毒的組合物。

6.根據權利要求1-4中任一權利要求所述的試劑盒和/或權利要求5所述的組合物，其特征在于：所述組合物的各組分為液體和/或固體粉末。

7.用于檢測蓋塔病毒的系統，其特征在于：所述系統含有權利要求1-4中任一權利要求所述的試劑盒和熒光檢測儀器。

8.權利要求1-4中任一權利要求所述的試劑盒和/或權利要求5所述的組合物在蓋塔病毒檢測或輔助檢測中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述檢測或輔助檢測的RT-RAA反應條件為39℃恒溫反應30min。

10.權利要求5所述的組合物在制備蓋塔病毒檢測或輔助檢測產品中的應用。