[發(fā)明專利]檢測蓋塔病毒的熒光RT-RAA引物、試劑盒及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202111191385.0 | 申請日： | 2021-10-13 |
| 公開（公告）號： | CN114015805A | 公開（公告）日： | 2022-02-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 徐志文;周遠(yuǎn)成;朱玲;聶民財;鄺山 | 申請（專利權(quán)）人： | 四川農(nóng)業(yè)大學(xué);畜科生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 檢測 病毒 熒光 rt raa 引物 試劑盒 及其 應(yīng)用 | ||
1.基于熒光RT-RAA用于檢測蓋塔病毒的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括檢測蓋塔病毒的組合物；所述組合物包括引物RT-RAA-F2、RT-RAA-R2和探針；所述引物RT-RAA-F2的核苷酸序列如序列表中序列2所示；所述引物RT-RAA-R2的核苷酸序列如序列表中序列3所示；所述探針的核苷酸序列如序列表中序列4所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述探針具有下述任一修飾或其組合：
A1)在序列表中序列4第31核苷酸上標(biāo)記熒光基團；
A2)在序列表中序列4的第32位核苷酸標(biāo)記淬滅基團；
A3)在序列表中序列4的第31位堿基和32位堿基中間用四氫呋喃修飾；
A4)在序列表中序列4的第46位核苷酸用C3-spacer標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括RT熒光基礎(chǔ)反應(yīng)單元；所述RT熒光基礎(chǔ)反應(yīng)單元包含單鏈DNA結(jié)合蛋白、重組酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和/或DNA聚合酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括鎂離子緩沖液。
5.權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的檢測蓋塔病毒的組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的試劑盒和/或權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于：所述組合物的各組分為液體和/或固體粉末。
7.用于檢測蓋塔病毒的系統(tǒng)，其特征在于：所述系統(tǒng)含有權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的試劑盒和熒光檢測儀器。
8.權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的試劑盒和/或權(quán)利要求5所述的組合物在蓋塔病毒檢測或輔助檢測中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述檢測或輔助檢測的RT-RAA反應(yīng)條件為39℃恒溫反應(yīng)30min。
10.權(quán)利要求5所述的組合物在制備蓋塔病毒檢測或輔助檢測產(chǎn)品中的應(yīng)用。
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