[發(fā)明專利]一種用于飼用添加劑的丁酸梭菌及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111190250.2
• 申請(qǐng)日: 2021-10-13
• 公開（公告）號(hào): CN114231434A
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韋朝英;蘇智興;李曉明;周志強(qiáng);李從;羅石林;陸迪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南寧市拜歐生物工程有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23K10/18;C12R1/145
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于飼用添加劑的丁酸梭菌及其應(yīng)用，其特征在于：所述丁酸梭菌，保藏號(hào)CGMCC No.22880，保藏于北京微生物菌種保藏中心。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于飼用添加劑的丁酸梭菌及其應(yīng)用，其特征在于：所述菌株在發(fā)酵過程中種子液的接種量2％～10％(V/V)接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，溫度25℃～42℃，發(fā)酵20h～60h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于飼用添加劑的丁酸梭菌及其應(yīng)用，其特征在于：所述丁酸梭菌的冷凍干燥益生菌劑的菌落數(shù)在108～109cfu/g。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于飼用添加劑的丁酸梭菌及其應(yīng)用，其特征在于：所述包括如下步驟，

(1)菌株平板、液體培養(yǎng)

丁酸梭菌RCM固體培養(yǎng)基：胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉3g，氯化鈉5g，葡萄糖4g，無(wú)水乙酸鈉3g，可溶性淀粉1g，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5g，瓊脂20g，加蒸餾水至1000mL，pH 7.2±0.1，121℃滅菌20分鐘；

丁酸梭菌RCM液體培養(yǎng)基：胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉3g，氯化鈉5g，葡萄糖4g，無(wú)水乙酸鈉3g，可溶性淀粉1g，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5g，加蒸餾水至1000mL，pH 7.2±0.1，121℃滅菌20分鐘；

所述丁酸梭菌，首先用固體培養(yǎng)基進(jìn)行平板培養(yǎng)，接著用液體培養(yǎng)基進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，接著按照6％(V/V)接種量接入液體培養(yǎng)基作為一級(jí)種子液，然后按照6％(V/V)接種量接入液體培養(yǎng)基作為二級(jí)種子液；

(2)發(fā)酵培養(yǎng)基：可溶性淀粉5～10g/L，玉米粉20～30g/L，百香果皮10～20g/L，硫酸錳0.01～0.1g/L，硫酸鎂0.1～0.5g/L，酵母粉10～20g/L，磷酸氫二鉀0.1～1g/L，F(xiàn)eSO4 1～2g/L米粉廢水替代水作為液體補(bǔ)充，混合攪拌，110℃滅菌20分鐘。

(3)丁酸梭菌發(fā)酵工藝

將步驟(1)種子液培養(yǎng)后的丁酸梭菌采用比濁法調(diào)整濃度，然后按照接種量2％～10％(V/V)接入步驟(2)中制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中，溫度25℃～42℃，發(fā)酵24h～60h；

(4)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離，上清為有機(jī)酸混合液，沉淀為菌體，在菌體中添加保護(hù)劑后進(jìn)行冷凍干燥，即得飼料添加劑成品。