[發(fā)明專利]雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111186210.0
• 申請(qǐng)日: 2021-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114129721A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹文竹;張金秋;周明旭;盧宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K39/39
• 分類號(hào): A61K39/39;A61K47/59;A61P37/04;A61K49/00;C08G69/48
• 代理公司: 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32238
• 代理人: 袁靜

本發(fā)明提供雙親性咪喹莫特嫁接γ?聚谷氨酸月桂酯及其應(yīng)用，屬于生物醫(yī)用材料領(lǐng)域。雙親性咪喹莫特嫁接γ?聚谷氨酸月桂酯，采用包括如下步驟的方法制備：（1）在無(wú)水氛圍下，將γ?聚谷氨酸分散在非質(zhì)子溶劑中，然后加入催化劑N,N?二甲基甲酰胺，在攪拌狀態(tài)下，滴入氯化劑，反應(yīng)10?40小時(shí)；（2）將咪喹莫特、脂溶性醇和縛酸劑加入步驟（1）反應(yīng)后所得溶液中，反應(yīng)42?54小時(shí)；（3）純化后，得到雙親性咪喹莫特嫁接γ?聚谷氨酸月桂酯材料。本發(fā)明雙親性咪喹莫特嫁接γ?聚谷氨酸月桂酯及其熒光素標(biāo)記物，不僅水溶性好，具良好的生物相容性，降低了毒副作用，而且能夠提高機(jī)體特異性免疫應(yīng)答，是理想的佐劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，具體涉及雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

接種疫苗被認(rèn)為是當(dāng)今社會(huì)預(yù)防傳染病最經(jīng)濟(jì)、最方便和最有效的方法之一。在免疫過(guò)程中，抗原遞送是至關(guān)重要的一步。在疫苗的實(shí)際使用過(guò)程中，由于許多抗原單獨(dú)施用時(shí)不足以賦予免疫性抗體應(yīng)答，這就需要設(shè)計(jì)能固定抗原并刺激免疫應(yīng)答的佐劑。

Toll樣受體(Toll-like receptor，TLR)是一類模式識(shí)別受體(Patternrecognition receptor，PRR)，這種受體在受到微生物特殊的保守產(chǎn)物-病原體相關(guān)分子模式(Pathogenassociated molecular patterns，PAMPs)激活時(shí)，不僅會(huì)誘導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，同時(shí)還能激活獲得性免疫系統(tǒng)，是理論上佐劑的理想選擇。近年來(lái)，人工合成的咪喹莫特(R837)作為T(mén)LR 7激動(dòng)劑，是小分子免疫調(diào)節(jié)劑，具有優(yōu)異的抗病毒、抗腫瘤能力。因?yàn)橄鄬?duì)分子量小，可以通過(guò)多種途徑進(jìn)入體內(nèi)，提高抗原呈遞的細(xì)胞活性，聚集較多的樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞等到接種位點(diǎn)，增強(qiáng)局部免疫反應(yīng)。可是，咪喹莫特也存在以下缺陷：(1)在水中以及常見(jiàn)有機(jī)溶劑中溶解度較小，因此不易制備成注射劑，對(duì)細(xì)胞有一定的毒性；(2)單一使用R837會(huì)產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，例如紅斑、糜爛、剝脫/剝落和水腫等屬于常見(jiàn)不良反應(yīng)；(3)咪喹莫特的藥代動(dòng)力學(xué)具有從局部(例如皮下或肌肉內(nèi))迅速向全身擴(kuò)散等特點(diǎn)，從而在多個(gè)遠(yuǎn)端組織引起不必要的內(nèi)在免疫激活。由于這些缺點(diǎn)的存在，使其應(yīng)用受到了限制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯，不僅水溶性好，具良好的生物相容性，降低了毒副作用，而且能夠提高機(jī)體特異性免疫應(yīng)答，是理想的佐劑。

本發(fā)明的再一目的是提供雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯在疫苗佐劑方面的用途。

本發(fā)明的目的采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯，采用包括如下步驟的方法制備：

(1)在無(wú)水氛圍下，將γ-聚谷氨酸分散在非質(zhì)子溶劑中，然后加入催化劑N,N-二甲基甲酰胺，在攪拌狀態(tài)下，滴入氯化劑，反應(yīng)10-40小時(shí)；

(2)將咪喹莫特、脂溶性醇和縛酸劑加入步驟(1)反應(yīng)后所得溶液中，反應(yīng)42-54小時(shí)；

(3)純化后，得到雙親性咪喹莫特嫁接γ-聚谷氨酸月桂酯材料。

在本發(fā)明中，γ-聚谷氨酸的分子量為1-200萬(wàn)，優(yōu)選為30-70萬(wàn)；所述氯化劑為氯化亞砜、草酰氯或五氯化磷，優(yōu)選氯化亞砜和草酰氯；脂溶性醇為C8-C24醇、脂環(huán)醇或者甾醇，優(yōu)選正月桂醇或膽固醇；縛酸劑為三乙胺、4-N,N-二甲氨基吡啶、吡啶、無(wú)水碳酸銫、無(wú)水碳酸鉀、無(wú)水碳酸鈉、氫氧化鈉和氫氧化鉀中的一種。

在本發(fā)明中，非質(zhì)子溶劑中為二氯甲烷、氯仿、乙腈、二甲亞砜、N,N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、1,4-二氧六環(huán)和甲苯中的一種；所述非質(zhì)子溶劑優(yōu)選為二氯甲烷或乙腈。