[發(fā)明專利]一種乳酸菌發(fā)酵乳

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111179835.4
• 申請日: 2019-12-24
• 公開（公告）號: CN114657083A
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發(fā)明（設計）人: 顧青;顧容鋮;酈萍;劉娜娜
• 申請（專利權）人: 顧青
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23C9/123;C12R1/25
• 代理公司: 寧波理文知識產(chǎn)權代理事務所(特殊普通合伙) 33244
• 代理人: 李高峰;孟湘明

一種乳酸菌發(fā)酵乳，包括：由植物乳桿菌ZJ316發(fā)酵得到植物乳桿菌ZJ316發(fā)酵乳，在培養(yǎng)植物乳桿菌ZJ316時，將?80℃甘油管凍存的植物乳桿菌ZJ316于MRS固體平板劃線接種，37℃厭氧培養(yǎng)24h復蘇，經(jīng)兩次傳代活化后轉(zhuǎn)接于MRS液體，過夜培養(yǎng)菌液16?18h，6000r/min離心10分鐘，收集發(fā)酵上清液，菌泥用濃度為0.85％的滅菌生理鹽水洗滌兩次后，再用生理鹽水重懸，使菌懸液活菌數(shù)達約2.5×10⁹CFU/mL。

技術領域

本發(fā)明為母案申請?zhí)枮椤?01911342928.5”的分案申請，涉及一種乳酸菌發(fā)酵乳。

背景技術

潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis，UC)是一種由變態(tài)反應及理化因子引起的病因復雜且具有并發(fā)結 腸癌危險的腸道炎癥性疾病，根據(jù)病程經(jīng)過分為急性潰瘍性結腸炎和慢性潰瘍性結腸炎。長期以來缺乏 有效的治療措施，因而該病不僅嚴重危害了人體健康，還給患者帶來了生活和經(jīng)濟上的雙重壓力和負擔。

目前結腸炎治療的主要方向是緩解臨床癥狀，預防并發(fā)癥發(fā)生，但還未研制出從病因根本出發(fā)治 療結腸炎的方法。藥物治療和手術治療為現(xiàn)階段最主要的結腸炎臨床治療方法。長期以來，氨基水楊酸、 抗生素、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、生物制劑等藥物常用于緩解結腸炎。氨基水楊酸主要包括美沙拉嗪 (5-氨基水楊酸)、柳氮磺胺吡啶，是治療輕中度結腸炎的首選藥物，其中，美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶可抑 制IL-1β和TNF-α等促炎性細胞因子的表達，抑制脂氧合酶途徑，清除自由基和氧化物，還能抑制NF- κB的激活，但該類藥物會引起患者頭痛，惡心等并發(fā)癥；抗生素可以促進有益菌數(shù)量的增加，而降低 致病菌的比例，盡管抗生素在調(diào)節(jié)結腸炎微生態(tài)失調(diào)中很有效，但依然存在患者會產(chǎn)生耐藥性這一大弊 端。糖皮質(zhì)激素能抑制炎癥和免疫反應，因此對治療結腸炎有重要的意義，此外糖皮質(zhì)激素可單獨使用 或與美沙拉嗪配合使用來緩解結腸炎，但其用量過高時，患者會出現(xiàn)水腫、高血糖、骨壞死、肌病等副 作用。免疫抑制劑可用于治療氨基水楊酸和糖皮質(zhì)激素均無效、療效欠佳或重度結腸炎患者，常用的免 疫制劑主要有6-巰嘌呤、硫唑嘌呤、甲氨喋呤等，但免疫制劑長期使用會引起皮疹、肺炎、黃疸等。常 用的生物制劑是英夫利昔單抗，其可通過封閉促炎效應，促進粘膜愈合和炎癥細胞凋亡從而有效減輕結 腸炎癥狀，但過多使用則會引起發(fā)燒等強烈的副作用。對于對一些嚴重并發(fā)癥的結腸炎患者，則需要進 行手術治療，但手術治療會帶來并發(fā)完全性腸梗阻，瘺管與膿腫形成，急性穿孔或不能控制的大量出血 等副作用。

目前，乳酸菌已經(jīng)用于UC的臨床緩解和預防，盡管其機理還未明確闡明，但乳酸菌在炎癥性腸 病治療中存在的潛在功效不可否認。Shen Z.H等人研究發(fā)現(xiàn)乳酸菌可能是通過單核因子NF-κB信號 通路，降低腫瘤壞死因子(TNF-α)，白細胞介素1(IL-1β)等促炎細胞因子水平的轉(zhuǎn)錄，而上調(diào)了抗炎因 子IL-10的表達，從而改善IBD癥狀。乳酸菌進入腸道后主要與宿主腸道中的粘液層、上皮細胞和人腸 相關淋巴組織三個部位發(fā)生作用。粘液層可限制共生菌結合的數(shù)量，內(nèi)層是緊密的黏蛋白亞層，限制細 菌的進入；腸上皮細胞則主要分泌抗菌物質(zhì)來調(diào)控免疫應答；腸淋巴組織也主要起免疫應答的作用。

Riley S.A等人發(fā)現(xiàn)，乳酸菌中一些乳桿菌屬能夠產(chǎn)生參與免疫調(diào)節(jié)的小分子物質(zhì)，其可誘導IL- 10等抑炎性細胞因子表達，進而對UC患者發(fā)揮抗炎作用。另外，當乳酸菌進入腸道后，與其他微生物 群落發(fā)生相互作用而結合，從而互相影響代謝作用而發(fā)揮益生作用。比如，研究發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌，能夠通 過特定的發(fā)酵途徑代謝碳水化合物，產(chǎn)生不同比例的乙酸等其他代謝產(chǎn)物，從而減緩結腸炎病情。有研 究報道，灌胃了德氏乳桿菌、保加利亞亞種和干酪乳桿菌的小鼠中抗炎細胞因子IL-10增加，而促炎細 胞因子IL-2和IL-12的明顯降低。此外，還有實驗已經(jīng)證實乳酸菌能夠改變腸易激綜合征(IBS)患者的菌 群結構，降低有害菌的豐度，增加益生菌多樣性。盡管益生菌在IBD等炎癥性疾病中的療效已經(jīng)被證實， 但其機制尚不能完全確定，仍然需要大量的研究來闡明。