[發明專利]一種可溶性I型膠原蛋白制備方法及其在化妝品中的應用

在審

• 申請號: 202111176943.6
• 申請日: 2021-10-09
• 公開（公告）號: CN113736841A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發明（設計）人: 王治國
• 申請（專利權）人: 廣州儷靈生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78;C07K1/30;A61K8/65;A61Q19/00
• 代理公司: 徐州拉沃智佳知識產權代理有限公司 32455
• 代理人: 李石鳳

1.一種可溶性I型膠原蛋白制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

1)選用新鮮牛筋為材料，經過機械方法及0.01％～0.1％復合軟化酶解法，在pH6.0～～7.0室溫處理2～5小時對牛筋進行去肉脂、去筋膜處理獲得牛筋條；然后用去離子水漂洗3～6次，牛筋條經冷凍結塊、機械粉碎獲得牛筋細粒；

2)采用去離子水按照牛筋顆粒重量的1～5％W/V投量，依據反應液體積加入0.1～0.5％W/V復合蛋白水解酶，酶活力大于10萬IU/g，用鹽酸或醋酸調酶解反應液的pH2.0～4.0，于6～15℃、轉速50～200rpm攪拌下酶水解2～4天，完成牛筋蛋白的復合酶水解；

3)采用8000～14000rpm,10℃低溫離心10～30min分離，獲得濃稠、透明的牛筋蛋白酶水解液；

4)按照牛筋蛋白酶水解液體積加入2.0～5.0％W/V NaCL，緩慢攪拌下沉淀出牛筋蛋白，后在3000～6000rpm 10℃離心20分鐘收集獲得蛋白沉淀1；

5)采用2～5％W/V去離子水重懸蛋白沉淀1，用醋酸或鹽酸調pH2.0～4.0，6～12℃下50～150rpm攪拌重溶蛋白至蛋白完全溶解；

6)采用飽和NaOH溶液在攪拌下調蛋白溶解液的pH9.0～12.0，加入0.2～2.0％W/V丁二酸酐或戊二酸酐或己二酸酐溶液的其中一種溶液，50～150rpm攪拌下反應3～6小時進行牛筋蛋白1分子結構的第一次改造；

7)改構結束后在攪拌下緩慢用醋酸或鹽酸溶液調pH4.0～5.0，靜置1～3小時產生大量絮狀蛋白沉淀；然后在3000～6000rpm 10℃離心20分鐘收集蛋白沉淀2；

8)采用步驟6、7、8相同的方法對蛋白沉淀2進行第二次化學改構，獲得改構沉淀蛋白3；

9)蛋白分子結構改造后，按照濕重蛋白2％W/V用無菌去離子水在潔凈區重懸蛋白沉淀3，醋酸或鹽酸調pH 2.0～4.0，在50～150rpm攪拌下溶解蛋白3，再用2～5％W/V NaCL沉淀出蛋白；4000rpm、10℃離心20分鐘收集蛋白沉淀4；

10)重復2次步驟9，最后在4000rpm、10℃離心20分鐘收集蛋白沉淀，合計洗滌蛋白3次，獲得終產品。

2.如權利要求1一種可溶性I型膠原蛋白制備方法制得的可溶性I型膠原蛋白，其特征在于應用在化妝水、柔膚水、爽膚水、面膜、精華液、乳液、按摩膏、營養霜、保濕霜、護手霜、粉底、洗面奶、身體乳或沐浴露。