[發(fā)明專利]一種嗜粘蛋白-艾克曼菌的特征肽及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111175902.5
• 申請日: 2021-10-09
• 公開（公告）號: CN114106101B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高神駿;馮麗君;高其康;樓兵干
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K7/06;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種嗜粘蛋白-艾克曼菌(Akkermansia muciniphila)的特征肽，其特征在于，氨基酸序列為LLDEGQAGDNVGLLLR、LMPVEDVFSISGR、VDFNVPLK和TAAEYDNYR中的至少一種。

2.如權(quán)利要求1所述特征肽在非醫(yī)學(xué)診斷為目的的檢測嗜粘蛋白-艾克曼菌中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，檢測使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用方法。

4.一種非醫(yī)學(xué)診斷為目的的檢測嗜粘蛋白-艾克曼菌的方法，其特征在于，使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用方法檢測樣品，若樣品中存在權(quán)利要求1所述特征肽，則樣品中存在嗜粘蛋白-艾克曼菌。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，待檢測的樣品為以下一種：

(1)人口腔、食道、胃、腸道或肺來源樣品，

(2)環(huán)境樣本。

6.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：將待測的樣品經(jīng)蛋白質(zhì)提取、胰蛋白酶進(jìn)行酶切處理后，取酶解溶液經(jīng)截留分子量3000的超濾管離心超濾，收集濾液冷凍干燥，脫鹽后干燥含多肽的洗脫液，加0.1％甲酸溶解，經(jīng)多肽含量定量后進(jìn)樣，經(jīng)液相色譜C₁₈柱梯度分離和高分辨質(zhì)譜進(jìn)行譜圖采集、鑒定。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用時，進(jìn)樣量為0.5～1μg，進(jìn)樣流速為10nL/分鐘；液相色譜C₁₈柱梯度分離的條件如下：A相為含0.1％甲酸的水溶液，B相為含0.1％甲酸的乙腈溶液。

8.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，譜圖采集時間為150分鐘，納升液相分離梯度如下：

9.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，高分辨質(zhì)譜進(jìn)行譜圖采集的參數(shù)如下：