[發明專利]一種同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111164758.5
• 申請日: 2021-09-30
• 公開（公告）號: CN113866409A
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 戚何妹;陶鑄;容志恩;亢中奎;丁文婷;秦莉;陳小平
• 申請（專利權）人: 廣州中科藍華生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N15/14
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 劉二艷

本發明提供了一種同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒及其應用，所述試劑盒包括抗體組合物，所述抗體組合物包括表面抗體組合物和胞內抗體組合物；所述表面抗體組合物包括Zombie NIR、CD45、Ly6G、CD11b、F4/80、Ly6c、NK1.1、CD3、CD4、CD25、CD8a、CD19、CD11c、CD80或CD206中的至少兩種的組合；所述胞內抗體組合物包括FoxP3、IL?10、Granzyme B、Perforin或IFN?γ中的至少兩種的組合。本發明還提供了一種檢測免疫細胞亞群變化的方法。所述試劑盒可以對多個免疫細胞亞群及功能的變化進行同時檢測，結果全面具體。

技術領域

本發明屬于免疫水平檢測技術領域，尤其涉及一種同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒及其應用。

背景技術

流式細胞術是一種對細胞群體中的單個細胞或類似細胞大小的顆粒進行連續檢測的技術，可以對細胞或顆粒的多個參數進行快速、高通量、精確的同時檢測。目前，流式技術已廣泛應用于血液學、免疫學、腫瘤學等科研或臨床的相關檢驗領域，是一種重要的檢測方法之一。

疾病在發生過程中常常伴隨著機體免疫水平的變化，如在腫瘤發生過程中，血液、脾臟和腫瘤組織中的主要免疫細胞亞群會發生明顯變化，包括CD4 T細胞、CD8 T細胞、Treg細胞、粒細胞、單核細胞、巨噬細胞、B細胞、NK細胞、MDSC細胞以及DC細胞等。檢測各種免疫細胞的改變差異，繪制免疫圖譜差異，對揭示包括腫瘤在內的疾病的發病機制、疾病與機體免疫水平變化的關系、疾病治療措施的有效性等多方面具有重要的作用，可用于判斷疾病進程及治療效果，并有望篩選到合適的預后指標。因此，一套覆蓋標志全面的流式檢測方案具有重要的意義。

現有的流式檢測技術中，很難實現在一次檢測中對多種細胞亞群同時進行檢測。因此，如何提供一種可同時檢測多種細胞亞群的產品及方法，已成為亟待解決的問題。

發明內容

針對現有技術的不足和實際需求，本發明提供一種同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒及其應用，通過試劑盒中不同抗體之間的相互配合，即可在一次檢測反應中確認多個免疫細胞亞群的變化情況，可以對機體中免疫細胞的功能變化進行全面的分析，分析更為全面，檢測效率更高。

為達此目的，本發明采用如下技術方案：

第一方面，本發明提供了一種同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒，所述同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒包括抗體組合物；

所述抗體組合物包括表面抗體組合物和胞內抗體組合物；

所述表面抗體組合物包括Zombie NIR、CD45、Ly6G、CD11b、F4/80、Ly6c、NK1.1、CD3、CD4、CD25、CD8a、CD19、CD11c、CD80或CD206中的至少兩種的組合；

所述胞內抗體組合物包括FoxP3、IL-10、Granzyme B、Perforin或IFN-γ中的至少兩種的組合。

本發明中，所述試劑盒中含有表面抗體組合物和胞內抗體組合物，可以在流式檢測中使用多種抗體同時進行標記，即可在一次檢測反應中對多種免疫細胞的功能變化進行同時檢測，有助于對疾病發生進行中主要免疫細胞的變化差異進行全面具體的分析，分析結果更加全面準確，且檢測效率更高，對于疾病的診斷、疾病進程的監控具有重要的意義。

本發明中，所述表面抗體組合物對胞體表面的受體進行檢測，所述胞內抗體組合物對胞內的細胞因子進行檢測。

本發明中，所述同時檢測多種細胞亞群及功能變化的試劑盒使用方便，操作簡單，檢測結果全面準確。

優選地，所述Zombie NIR在所述抗體組合物中的重量份數為0.05～0.2份，例如可以是0.05份、0.1份、0.15份或0.2份等，該數值范圍內的其他具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。