[發明專利]一種ASB17在制備TRAF6相關炎癥性疾病藥物中的用途

在審

• 申請號: 202111161621.4
• 申請日: 2021-09-30
• 公開（公告）號: CN113769099A
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 吳建國;楊戈;萬品;潭秋萍
• 申請（專利權）人: 佛山病原微生物研究院
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61P29/00;G01N33/68
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 張曉博

本發明屬于生物醫藥技術領域，公開了一種ASB17在制備TRAF6相關炎癥性疾病藥物中的用途，所述ASB17的Human ASB17Sequence.txt序列如SEQID NO：1所示，所述ASB17的Mouse ASB17Sequence.txt序列如SEQ ID NO：2所示；所述驗證ASB17制備治療TRAF6相關炎癥性疾病藥物的方法包括：小鼠原代細胞BMDCs和BMDMs分離；蛋白質免疫印跡、免疫共沉淀以及免疫熒光；蛋白質穩定性檢測及泛素化實驗。本發明通過研究推測，ASB17和TRAF6相互作用，能夠抑制TRAF6K48泛素化和穩定TRAF6，促進TRAF6介導的炎癥反應。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，尤其涉及一種ASB17在制備TRAF6相關炎癥性疾病藥物中的用途。

背景技術

目前，樹突狀細胞(DCs)是抵抗病原體必不可少的，但也可能有助于免疫病理。它們連接先天性和獲得性免疫反應，對宿主防御入侵病原體發揮著必不可少的作用。I型常規DCs(cDC1s)和cDC2s分別以BATF3/IRF-8和IRF4依賴的方式從共同的DCs前體發育而來，而漿細胞樣DCs(pDCs)可能來自共同的DCs和共同的淋巴祖細胞。樹突狀細胞對病原體的檢測主要由模式識別受體 (PRRs)介導，PRRs對樹突狀細胞的激活和隨后的免疫反應至關重要。PRRs 中有TLRs，由人類中的10個和小鼠中的12個成員組成。有趣的是，僅在小鼠中表達的TLR11和TLR12很少感受到病原體相關的分子模式分子(PAMP)。相反，TLR4在小鼠和人類的許多細胞類型中表達，包括cDC1s、cDC2s和pDCs，并在革蘭氏陰性細菌脂多糖(LPS)參與后誘導NF-κB和絲裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路的激活。值得注意的是，LPS對TLR4的過度刺激可能導致嚴重的具有膿毒癥狀的免疫病理。

通過Toll樣受體(TLRs)感應病原體時，DCs的激活主要由模式識別受體 /核因子-κB(NF-κB)信號介導，并取決于相應信號分子的適當泛素化。然而，參與其中的泛素化和去泛素化酶及其互相之間的關系還不完全清楚。TRAF6作為通過Toll樣受體激活NF-κB轉錄活性過程中重要的調控蛋白，其自身多聚泛素化在這個過程中頗為重要。目前，若干研究表明，K48連接的TRAF6泛素化可以促進TRAF6的降解，進而有效地阻斷了TLR依賴的炎癥信號通路。盡管如此，在TLRs依賴性先天免疫反應中調節K48泛素化和TRAF6蛋白水平的分子機制仍不清楚。

ASB家族蛋白包含有錨定蛋白重復結構域(ANK)和一個C末端的細胞因子信號抑制子盒子結構域(SOCS)，因ANK結構域數量的不同，ASB蛋白家族由ASB1到ASB18，一共18個成員組成。ASB家族和其他四個蛋白家族共同組成SOCS box超家族。包含有SOCS box的分子一般有2個功能性的蛋白質與蛋白質相互作用結構域，即底物結合結構域和SOCS box結構域，這使得它們能夠具備E3泛素連接酶的功能。雖然有報道稱ASB蛋白參與受體信號調節，但對ASB家族的具體功能知之甚少。ASB2在造血分化過程中能夠降解混合系白血病(MLL)蛋白，ASB2通過自身的ANK結構域與MLL相互作用，并泛素化和降解了MLL。Lumpkin等人首次解析了ASB9 E3泛素連接酶復合物的結構， ASB9招募CRL復合物，自己則識別并結合底物肌酸激酶B(CKB)。這也是 ASB家族的結構首次被解析，為后面其他ASB家族蛋白的研究提供了重要依據。最近ASB1被報道在炎癥反應中具有新穎的功能，它能減少TAB2的K48泛素化，進而穩定其表達，而當ASB1在小鼠中被敲除時，在面對細菌或脂多糖誘導的炎癥時，敲除小鼠的炎癥反應會減弱。大多數的研究表明ASB蛋白在細胞內組裝與Elongin B/C、Cullin5和Rbx2形成ECS E3泛素連接酶，靶向底物通過泛素蛋白酶體體系(UPS)降解。ASB17目前被研究的特別少，據報道它在小鼠和人的睪丸里特異性高表達，且表達具有時空特異性。關于ASB17的功能，基本沒有研究。

通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：ASB17的調控方式，以及如何下調ASB17表達水平來抑制TRAF6介導的炎癥反應仍未得到解決，同時關于ASB17的功能，基本沒有研究。