[發(fā)明專利]一種復(fù)合微生物菌劑及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111152902.3
• 申請日: 2021-09-29
• 公開（公告）號: CN113817643A
• 公開（公告）日: 2021-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉文波;秦春秀;繆衛(wèi)國;林春花;李瀟;陳代朋
• 申請（專利權(quán)）人: 海南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;A01N63/22;A01N63/23;A01N63/38;A01P3/00;C12R1/07;C12R1/885
• 代理公司: 海南漢普知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 46003
• 代理人: 麥海玲

1.一種復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：按照細胞數(shù)量計，原料主料包括5-15份的貝萊斯芽孢桿菌HAB-2、1-5份的貝萊斯芽孢桿菌HN-2、1-3份的蘇云金芽孢桿菌和1-3份的哈茨木霉。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：原料還包括輔料，所述主料與輔料的重量配比為10-30:1，所述輔料包括0.01-0.05重量份的尿素、0.01-0.02重量份的表面活性劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述表面活性劑為Tween20或Tween80。

4.一種權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)將貝萊斯芽孢桿菌HAB-2、貝萊斯芽孢桿菌HN-2、蘇云金芽孢桿菌分別在第一培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25-30℃，培養(yǎng)時間為36-48h，制成第一菌懸液，然后將所述第一菌懸液離心，獲得第一沉淀物；將哈茨木霉在第二培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28-32℃，培養(yǎng)時間為48-72h，制成第二菌懸液，然后將所述第二菌懸液離心，獲得第二沉淀物；

(2)將尿素、表面活性劑、第一沉淀物和第二沉淀物混合制得初級菌劑；

(3)將初級菌劑依次經(jīng)過預(yù)冷、二次冷凍和冷凍干燥，最后制成所述復(fù)合微生物菌劑凍干粉。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：所述第一培養(yǎng)基的組分重量配比為：蛋白胨5-10份、酵母浸出粉1-5份、氯化鈉8-10份、蒸餾水500-800份，并調(diào)節(jié)pH7.0-7.5。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：所述第二培養(yǎng)基的組分重量配比為：蛋白胨5-10份、酵母浸出粉1-3份、葡萄糖10-20份、磷酸氫二鉀0.2-0.5份、硫酸鎂0.5-1份、蒸餾水800-1000份，并調(diào)節(jié)pH6.2-6.6。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：步驟(1)中所述離心的轉(zhuǎn)速為4000-5000r/min，離心時間為10-15min。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：步驟(3)中預(yù)冷溫度為0-4℃，預(yù)冷時間為10-15min；二次冷凍溫度為－20℃至－30℃，二次冷凍時間為60-120min；冷凍干燥的溫度為－50℃至－60℃，冷凍時間為6-12h。

9.權(quán)利要求1-8任一權(quán)利要求所述的復(fù)合微生物菌劑的使用方法，其特征在于：所述復(fù)合微生物菌劑中的總菌株濃度≥10⁸cfu/mL，使用時將所述復(fù)合微生物菌劑用水稀釋500-1000倍，采用葉面噴施方式，噴施用量為1-1.5kg/畝，每10-15天使用一次。

10.權(quán)利要求1-8任一權(quán)利要求所述的復(fù)合微生物菌劑的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用包括防治黃瓜炭疽病、綠橙炭疽病、魚尾葵炭疽病、苦瓜炭疽病、火龍果軟腐病和結(jié)球甘藍軟腐病。