[發明專利]四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法

有效

• 申請號: 202111149499.9
• 申請日: 2021-09-29
• 公開（公告）號: CN113788869B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 曾小斌;葛嵐嵐;江園園;謝秋杰;李陽芳;繆雨陽
• 申請（專利權）人: 深圳市人民醫院
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08;A61P29/00
• 代理公司: 北京匯眾通達知識產權代理事務所(普通合伙) 11622
• 代理人: 宿央央

1.四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，包括化合物(1)、化合物(2)、化合物(3)和化合物(4)，其特征在于，所述化合物(1)的結構經檢測確定為6'-O-[(E)-sinapoyl]-6β-hydroxy-gardoside，其化學結構式為

所述化合物(2)的結構經檢測確定為6'-O-[(E)-sinapoyl]shanzhiside，其化學結構式為

所述化合物(3)的結構經檢測確定為6'-O-[(E)-sinapoyl]ixoside，其化學結構式為

所述化合物(4)的結構經檢測確定為6'-O-[(E)-sinapoyl]geniposidic?acid，其化學結構式為

四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，包括如下步驟：

S1：在室溫下，用乙醇對梔子進行多次冷浸、滲漉提取，合并提取液，接著，減壓回收溶劑，并濃縮得乙醇浸膏；

S2：將上述乙醇浸膏混懸于水，然后分別用石油醚和乙酸乙酯進行萃取，得到石油醚浸膏，乙酸乙酯浸膏以及水部位浸膏；

S3：將上述水部位浸膏，用少量純水溶解，利用大孔樹脂柱進行梯度洗脫，回收溶劑后得到4個洗脫組分Fr?A～Fr?D；

S4：取Fr?C，用甲醇溶解過濾，利用反向色譜柱進行梯度洗脫，回收溶劑后得到4個洗脫組分Fr?C20、Fr?C30、Fr?C50和Fr?C80；

S5：取Fr?C30，用少量二氯甲烷-甲醇溶解，并進行凝膠柱層析實施等度洗脫；采用薄層TLC分析，合并相同流分后獲得6個組分Fr?C30-1～Fr?C30-6；

S6：取組分Fr?C30-1，用少量二氯甲烷-甲醇溶解，并進行凝膠柱層析實施等度洗脫；采用薄層TLC分析，合并相同流分后獲得3個組分Fr?C30-1-1～Fr?C30-1-3；取組分Fr?C30-1-1，用甲醇溶解過濾，經過Rp-18高效液相色譜粗分離，在保留時間為42.0-43.0min得到化合物(1)；

S7：取組分Fr?C30-3，用少量二氯甲烷-甲醇溶解，并進行凝膠柱層析實施等度洗脫；采用薄層TLC分析，合并相同流分后獲得5個組分Fr?C30-3-1～Fr?C30-3-5；取組分Fr?C30-3-2，用甲醇溶解過濾，經過Rp-18高效液相色譜粗分離，在保留時間為42.0-44.0min得到化合物(2)；取組分Fr?C30-3-3，用甲醇溶解過濾，經過Rp-18高效液相色譜粗分離，在保留時間為59.0-62.0min和65.0-67.0min分別得到化合物(3)和化合物(4)；

所述高效液相色譜粗分離采用的色譜柱的規格為Cosmosil?5C18-MS-II，5μm，20*250mm；其采用的流速為8mL/min，流動相為甲醇/水。

2.根據權利要求1所述的四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，其特征在于，上述步驟S1中所述乙醇的濃度為85％。

3.根據權利要求1所述的四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，其特征在于，上述步驟S3中所述的大孔樹脂為D101，梯度洗脫采用的洗脫液依次為水、體積比為30：70的乙醇-水、體積比為50：50的乙醇-水以及體積比為80：20的乙醇-水。

4.根據權利要求1所述的四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，其特征在于，上述步驟S4中所述的反向色譜為ODS，梯度洗脫采用的洗脫液依次為體積比為20：80的甲醇-水、體積比為30：70的甲醇-水、體積比為50：50的甲醇-水以及體積比為80：20的甲醇-水。

5.根據權利要求1所述的四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，其特征在于，上述步驟S5中所述的凝膠柱層析的凝膠為Sephadex?LH-20，等度洗脫劑為二氯甲烷-甲醇，其中，二氯甲烷與甲醇的體積比為50:50。

6.根據權利要求1所述的四種環烯醚萜苷類化合物的制備方法，其特征在于，上述步驟S6和S7中所述的凝膠柱層析的凝膠為Sephadex?LH-20，等度洗脫劑為二氯甲烷-甲醇，其中，二氯甲烷與甲醇的體積比為70:30。