[發明專利]一種裂褶菌發酵物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202111147608.3
• 申請日: 2021-09-29
• 公開（公告）號: CN113755544B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 單玉飛;吳雅勤
• 申請（專利權）人: 廣州恒雅生物化工有限公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12N1/14;C08B37/00;A61K8/73;A61K31/715;A61Q19/00;A61P17/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京君有知識產權代理事務所(普通合伙) 11630
• 代理人: 焦麗雅

本發明涉及一種裂褶菌發酵物的制備方法、由該方法制備得到的裂褶菌發酵物、含有該裂褶菌發酵物(含裂褶菌素)的皮膚用化妝品、以及該裂褶菌發酵物在制備藥物或皮膚用化妝品中的用途。其中該裂褶菌發酵物的制備方法包括如下步驟：種子活化、種子液制備、深層發酵、粗多糖提取、去蛋白、純化、精制。通過本發明的制備方法得到的裂褶菌發酵物，具有吸收速度快、穩定性高的良好技術效果。

技術領域

本發明涉及一種裂褶菌發酵物，其制備方法，以及該裂褶菌發酵物的用途。

背景技術

裂裥菌素（Sizofiran或Schizophyllan），又稱為西佐喃、裂裥多糖或裂褶多糖，是由裂褶菌（ Schizophyllum?commune）子實體經提取或液體深層發酵產生的一種中性多糖，其分子結構式如下所示：

。

裂裥菌素是以葡萄糖為單一組分的β-(1-3)-D葡聚糖，其中每三個葡萄糖分子上鏈接有一個β-(1-6)葡萄糖苷分支（參見鄭必勝等，羧甲基裂褶多糖的制備及其保濕活性研究，現代食品科技，2017，第33卷第8期，第254頁）。裂裥菌素獨特的三螺旋結構和恰當的分支度（0.33），使它在調節皮膚免疫、促進皮膚細胞增殖、膠原蛋白合成、延緩衰老、清除自由基、對抗紫外線、曬后修復、抗炎方面均有很好的作用，加之其天然水溶，來源安全，非常適合在化妝品和皮膚病上的應用。裂裥菌素的護膚作用，具體表現為保濕、抗氧化之功效，因而可用于改善皮膚潤澤度，并延緩皮膚衰老（參見張琪等，裂褶多糖保濕功效評價，中國食品學報，2015年，第15卷第3期，第223-227頁）。

裂裥菌素的制備主要有兩種途徑，一是從野生或人工栽培的子實體中提取獲得，二是從發酵培養的發酵液或菌絲體中提取獲得。但從途徑一的子實體中難以大量提取裂裥菌素，因為野生菌的子實體產量低二人工栽培的裂褶菌周期長且效率低下。在發酵培養中又可分為液體發酵法和固體發酵法，其中液體發酵發的生產周期短、產量大、易于大規模工業生產，而固體發酵雖然具有設備簡單、培養基成本低、能耗低等優點，但存在發酵周期長的缺點。因此，液體發酵仍然是生產裂裥菌素的主要途徑。

液體發酵的產物經過提取后將得到裂裥菌素的粗多糖，再經過純化后可得到高品質的裂褶菌發酵物。作為生物制品，發酵和提取裂裥菌素的方法將會影響所得產品的吸收速度、穩定性等性質。如何加快化妝品中裂裥菌素組合物的吸收速度，提高裂裥菌素的穩定性，成為本領域技術人員需要解決的技術問題。

發明內容

本發明涉及一種裂褶菌發酵物的制備方法，包括如下步驟：

（1）種子活化：取裂褶菌（ Schizophyllum?commune?Fr.）斜面菌種接入PDA培養基，在25-30℃下培養至布滿斜面，得到活化的斜面種子；

（2）種子液制備：將所述活化的斜面種子從斜面培養基接入含液體培養基的錐形瓶中，在25-30℃下以200rpm的速度攪拌，培養5天后得到發酵種子液；

（3）深層發酵：將所述發酵種子液接入含有培養基的發酵罐中進行深層發酵，其中接種量5-10重量%，靜置培養6天，得到裂褶菌的發酵菌絲體；其中所用的培養基為：葡萄糖12-18重量%、酵母粉7-8重量%、蛋白胨5-7重量%、KH₂PO_4?0.5-1.0重量%和MgSO₄·7H₂O?0.2-0.6重量%；

（4）粗多糖提取：將步驟（3）得到的發酵菌絲體采用膠體磨粉碎，并且加入蒸餾水形成粗多糖料液，在60-70℃下攪拌3-5小時，離心除雜，將得到的提取液濃縮至原體積的1/2至1/3，再加入無水乙醇沉淀，將沉淀用蒸餾水復溶，得到粗多糖提取液；