[發明專利]CD3/CD28/DLL4磁珠及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 202111136655.8 | 申請日： | 2021-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN113832102A | 公開（公告）日： | 2021-12-24 |
| 發明（設計）人： | 孟麗君;張珍琦;鄧猛猛;胡紹燕 | 申請（專利權）人： | 蘇州東嶺生物技術有限公司;蘇州大學附屬兒童醫院 |
| 主分類號： | C12N5/0783 | 分類號： | C12N5/0783;H01F1/42;H01F41/00 |
| 代理公司： | 蘇州根號專利代理事務所(普通合伙) 32276 | 代理人： | 朱華慶 |
| 地址： | 215000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | cd3 cd28 dll4 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種CD3/CD28/DLL4磁珠，其特征在于所述磁珠表面耦連有抗人CD3抗體、抗人CD28抗體以及重組人DLL4蛋白。
2.根據權利要求1所述的CD3/CD28/DLL4磁珠，其特征在于：所述磁珠為超順磁性磁珠，磁珠表面為聚苯乙烯涂層，涂層表面用羧基修飾，磁核為氧化鐵。
3.根據權利要求1所述的CD3/CD28/DLL4磁珠，其特征在于：所述抗人CD3抗體克隆號為OKT3，抗人CD28抗體克隆號為CD28.2。
4.根據權利要求1所述的CD3/CD28/DLL4磁珠，其特征在于：所述重組人DLL4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的CD3/CD28/DLL4磁珠，其特征在于：偶聯到磁珠上的抗人CD3抗體：抗人CD28抗體：重組人DLL4蛋白重量比為10~50:10~50:1~15。
6.權利要求1-5中任一項所述的CD3/CD28/DLL4磁珠的制備方法，其特征在于其步驟包括：1）洗滌磁珠，將磁珠和活化劑EDC混合進行活化反應；
2）將CD3抗體、CD28抗體和重組DLL4蛋白分別加入磁珠懸液并共孵育一定時間，得到CD3/CD28/DLL4磁珠；
3）CD3/CD28/DLL4磁珠洗滌后，放置于儲存液中保存。
7.根據權利要求6所述的CD3/CD28/DLL4磁珠的制備方法，其特征在于：步驟1）中洗滌采用洗滌液A，洗滌液A為MEST緩沖液；步驟3）中洗滌采用洗滌液B，洗滌液B為TBST緩沖液。
8.根據權利要求7所述的CD3/CD28/DLL4磁珠的制備方法，其特征在于：儲存液為細胞培養用磷酸鹽緩沖液PBS。
9.權利要求1-5中任一項所述的CD3/CD28/DLL4磁珠在作為人T淋巴細胞的活化擴增劑中的應用。
10.一種人T淋巴細胞的活化擴增劑，其特征在于：含有權利要求1-5中任一項所述的CD3/CD28/DLL4磁珠。
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