[發明專利]一種緩沖液及膠質纖維酸性蛋白的凍干方法有效

申請號：	202111135934.2	申請日：	2021-09-27
公開（公告）號：	CN113759130B	公開（公告）日：	2022-05-17
發明（設計）人：	李博飛;劉聰;楊濤;張廣俊;馮玉靜;孫佳;鄭興華;張明琛	申請（專利權）人：	北京美聯泰科生物技術有限公司
主分類號：	G01N33/68	分類號：	G01N33/68;G01N33/531;G01N33/53
代理公司：	北京精金石知識產權代理有限公司 11470	代理人：	朱寶莉
地址：	100176 北京市大興區北京經***	國省代碼：	北京;11
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種緩沖液膠質纖維酸性蛋白方法
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【權利要求書】：

1.一種緩沖液在保存膠質纖維酸性蛋白中的應用，其特征在于，所述緩沖液由以下組分制成：4-嗎啉乙磺酸、NaCl、ZnCl₂、MgCl₂·6H₂O、牛血清白蛋白、酪蛋白、甘氨酸、聚乙二醇、海藻糖、水；

按照重量份數計：4-嗎啉乙磺酸 5-30份、NaCl 8-12份、ZnCl₂ 0.01-0.5份、MgCl₂·6H₂O 0.1-15份、牛血清白蛋白 2-50份、酪蛋白 2-50份、甘氨酸 1-15份、聚乙二醇 0.2-25份、海藻糖 10-100份。

2.如權利要求1所述緩沖液的應用，其特征在于，按照重量份數計，所述緩沖液，包括以下組分：4-嗎啉乙磺酸 10-20份、NaCl 9-10份、ZnCl₂ 0.01-0.1份、MgCl₂·6H₂O 0.1-5份、牛血清白蛋白 5-10份、酪蛋白 5-10份、甘氨酸 1-5份、聚乙二醇 0.2-5份、海藻糖 10-30份。

3.如權利要求1所述緩沖液的應用，其特征在于，所述緩沖液中還包括表面活性劑，所述表面活性劑為吐溫20、吐溫60或吐溫80中的任一種或多種。

4.如權利要求3所述緩沖液的應用，其特征在于，所述表面活性劑為吐溫20。

5.如權利要求1所述緩沖液的應用，其特征在于，所述緩沖液中，甘氨酸：聚乙二醇：海藻糖的質量比為1-10:0.2-10:10-50，所述緩沖液的pH值為5.8-7.5。

6.如權利要求3所述緩沖液的應用，其特征在于，所述的緩沖液的制備方法，包括以下步驟：稱取表面活性劑加入純化水中，再依次加入4-嗎啉乙磺酸、NaCl、ZnCl₂、MgCl₂·6H₂O、牛血清白蛋白、酪蛋白、甘氨酸、聚乙二醇、海藻糖，攪拌至完全溶解，調節pH值并定容，過濾，即可。

7.如權利要求6所述緩沖液的應用，其特征在于，所述表面活性劑在緩沖液中的體積分數為0.02-1%；所述過濾使用0.2-0.5μm的濾膜進行。

8.如權利要求6所述緩沖液的應用，其特征在于，所述過濾使用0.2μm的濾膜進行。

9.一種膠質纖維酸性蛋白的凍干方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）預冷凍段：在常溫下，將膠質纖維酸性蛋白放入緩沖液中，制成含有膠質纖維酸性蛋白的緩沖液體系，將緩沖液體系放置樣品艙中，先將緩沖液體系降溫至4℃，保溫；再將緩沖液體系降溫至-40℃，保溫，再將緩沖液體系降溫至-55℃，保溫；

（2）升華干燥段：將樣品艙的真空度降至0-5pa；再溫度升至-40℃，保溫；再升溫至-30℃，保溫；再升溫至-20℃，保溫；再升溫至-10℃，保溫；再升溫至-5℃，保溫；

（3）解析干燥段：將樣品艙真空度維持在0-5pa；設置溫度終點25℃，從-5℃提升至25℃；在25℃持續保溫；

所述緩沖液由以下組分制成：4-嗎啉乙磺酸、NaCl、ZnCl₂、MgCl₂·6H₂O、牛血清白蛋白、酪蛋白、甘氨酸、聚乙二醇、海藻糖、水；

10.如權利要求9所述膠質纖維酸性蛋白的凍干方法，其特征在于，